Cortisol como inhibidor de la entrada de LDL-Ox y de la remoción de colesterol en macrófagos THP1

JUAN D. TOLEDO; LEDDA, ANGELO; ESTEVE RAFOLS, MONTSERRAT; GRASA, MARÍA DEL MAR; JOSE GULFO; GARDA, H. A.; DÍAZ LUDOVICO IVO; GONZALEZ MARINA CECILIA

La Plata

Jornada; Primeras Jornadas conjuntas de Extensión, Investigación y Docencia de la Facultad de Ciencias Médicas; 2016

Facultad de Ciencias Médicas

Introducción: El rol de los glucocorticoides en el desarrollo de la ateroesclerosises discutido mostrando diferentes efectos en humanos y en modelosexperimentales de animales. La ateroescleroisis es el resultado de unarespuesta inflamatoria crónica frente a un endotelio injuriado, donde unaentrada descontrolada de LDL-Ox (lipoproteínas de baja densidad oxidadas) enmacrófagos desencadena su transformación en células espumosas (foams cells), el mayor componente de lasestrías grasas en la placa arterosclerótica. Existe poca evidencia del efectodirecto de los glucocorticoides sobre los macrófagos espumosos. Objetivos:El objetivo de este estudio es investigar acerca delrol del cortisol y el de su metabolito inactivo la cortisona en la formación delas foams cells, componente principalde las placas arteroscleróticas. Materialesy métodos:Se emplearon células THP1 diferenciadas a macrófagoscon ésteres de forbol (PMA) y posteriormente incubadas con LDL-Ox o con LDL-Oxen presencia de cortisol o cortisona. Se analizó la expresión génica de genesinvolucrados en el influjo y eflujo de colesterol por PCR en tiempo real.Asimismo se cuantificaron gotículas lipídicas citoplasmáticas por la técnica deoil red luego de la exposición de las células a los glucocorticoides. Resultados:Nuestros resultados muestran que los macrófagosexpuestos a LDL-Ox con cortisol y a LDL-Ox con cortisona exhiben una disminución significativa de la expresiónde genes involucrados en la inflamación en relación a células tratadas únicamentecon LDL-Ox. Sin embargo, células expuestas a LDL-Ox con cortisona junto a uninhibidor de la conversión de cortisona a cortisol (BTV.2733) no evidenciaron disminuciónen dicha expresión génica. Estos resultados indican que el efecto en ladisminución de la inflamación es debido únicamente al cortisol. Asimismo seanalizaron genes de receptores específicos de la entrada de las LDL-Ox, delalmacenamiento del colesterol en gotículas lipídicas y de receptoresinvolucrados en el eflujo del colesterol del tipo ATP binding cassette o ABC. Nuestros resultados indican unadisminución en la expresión de genes involucrados en el influjo y eflujo delcolesterol resultando en una reducción de la acumulación lipídica. El análisisde las gotículas lipídicas o lipids dropletsevidenció un incremento de 2.4 veces por efecto de las LDL-Ox, sin embargo,cuando el cortisol y la cortisona estuvieron presentes el incremento fue menor,aproximadamente 1.9. La presencia de los glucocorticoides causa una tendencia adisminuir en un 20% la acumulación del colesterol inducida por LDL-Ox. Lapresencia de BTV.2733 bloqueó el efecto de la cortisona resultando en unaacumulación de lípidos celulares similar al tratamiento de las células conLDL-Ox en ausencia de la hormona. Conclusiones:La presencia de las LDL-Ox en el medio de cultivoactiva la expresión de genes involucrados en la entrada de las LDL-Ox, en laesterificación y en la remoción del colesterol, sin embargo, el cortisolpromueve el efecto contrario resultando una menor acumulación de gotículas lipídicas.Estos resultados muestran un efecto antiaterogénico directo  del cortisol en macrófagos THP1 Este efecto estaría en parte mediado por laactividad de la enzima hidroxi esteroide deshidrogenasa de tipo 1(11βHSD1), quecataliza la conversión del metabolito inactivo cortisona en cortisol.