Glucocorticoides como reguladores de la expresión génica en macrófagos humanos

DIAZ LUDOVICO IVO; LEDDA, ANGELO; ESTEVE RAFOLS, MONTSERRAT; GRASA, MARÍA DEL MAR; JUAN D. TOLEDO; GARDA, H. A.; GONZALEZ MARINA CECILIA

La Plata

Jornada; Jornadas de la Facultad de Cs. Médicas; 2014

Fac. Cs. Médicas

Introducción:Los glucocorticoides son antiinflamatoriosque actúan en la resolución de la inflamación mediante la activación demacrófagos por la vía alternativa M2c anti-inflamatorios, entre otras acciones.Se considera que los glucocorticoides están implicados en el desencadenamientoy/o mantenimiento de la obesidad, tal como se ha postulado para laaterosclerosis.A nivel de tejidos periféricos, entre elloslas células del sistema inmune, la señal glucocorticoide puede verseamplificada o inhibida por la actividad de las enzimas 11β-hidroxiesteroidedeshidrogenasa de tipo 1 (11βHSDH1) y de tipo 2 (11βHSDH2), respectivamente. Laexpresión de 11βHSD1 está involucrada en la reducción de cortisona a cortisol(forma activa del glucocorticoide) y la 11βHSDH2 transforma al cortisol en cortisona(glucocorticoide inactivo). Objetivos:  -         Evaluar el efecto del cortisol y cortisona sobre laexpresión de genes involucrados en la respuesta pro-inflamatoria como TNFα, FAT/CD36, IL6 y en el procesoanti-inflamatorio como 11ßHSD1, rIL10, MMR.            Materialesy métodos:       -         Monocitos humanos de la línea THP1 fueron transformados en macrófagospor la adición de ésteres de forbol (PMA) en el medio de cultivo. MacrófagosTHP1 fueron tratados con LDL-Ox/cortisol, LDL-Ox/cortisona oLDL-Ox/cortisona/BVT 2733 (inhibidor específico de 11ßHSD1) alternativamente  por 24 horas. La fracción de LDL fue aisladade plasma humano y peroxidada in vitro con Cu++ para transformarlaen LDL-Ox. El ARNm de los distintos genes fue medido por el método cuantitativode PCR en tiempo real.    Resultados:-         Los resultados muestran una disminución de los marcadorespro-inflamatorios en células tratadas con dosis crecientes de cortisol.También, los tratamientos realizados con una dosis elevada de cortisona(1000nM) mostraron una disminución en la expresión de genes pro-inflamatorios.Sin embargo, cuando los macrófagos fueron incubados con altas dosis decortisona junto al inhibidor BVT 2733 no se observa la disminución en larespuesta pro-inflamatoria. -         Cuando los macrófagos son incubados con dosis crecientes de cortisol seobserva una disminución en la expresión del gen de la 11ßHSD1 y un incremento de laexpresion de la 11ßHSD2, sugiriendo la conversión del cortisol en cortisona.