Diferentes respuestas celulares causadas por un mutante de deleción de apolipoproteína A-I

CARLA MARIEL ALMEIDA; JUAN D. TOLEDO; LAURA CABALEIRO; HORACIO A. GARDA; GONZALEZ MARINA CECILIA

Ciudad autónoma de Buenos Aires

Jornada; V Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular de Lípidos y Lipoproteínas; 2012

Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad de Buenos Aires

Apolipoproteína A-I (apoA-I) tiene un rol importante antiaterogénico ya que es el componente proteico principal de lipoproteínas de alta densidad (HDL), las cuales intervienen en el transporte reverso del colesterol (TRC) haciendo que el exceso del colesterol (Col) sea transportado para su catabolismo. Pacientes portadores de una variante natural de apoA-I, la cual presenta una simple deleción de lisina en la posición 107 (K107), tienen entre otras situaciones patológicas un metabolismo alterado de las HDL y un riesgo incrementado a sufrir aterogénesis. Con el objetivo de analizar si ciertas respuestas celulares están alteradas por el tratamiento con K107 hemos comparado su funcionalidad con apoA-I wild type y con otra variante de deleción de lisina (K226). Macrófagos RAW 264.7 estimulados con las diferentes proteínas fueron usados para comparar la expresión y la esterificación del Col por acil CoA Col acil transferasa (ACAT). También hemos evaluado el eflujo de fosfolípidos de colina (FL) y el contenido intracelular de esfingomielina (EM) y fosfatidilcolina (FC). Hemos detectado que macrófagos y células epiteliales solo incubadas con K107 incrementan la expresión de ACAT ante diferentes condiciones de carga de colesterol (0, 50 µg/ml Col y LDL). Sin embargo, no hemos detectado un aumento de la actividad de ACAT ni un aumento en el ARN mensajero de la misma. Posiblemente el estímulo con K107 inactive al sistema de degradación natural de ACAT. Todas las proteínas fueron activas en promover el eflujo de FL, sin embargo, solo apoA-I hace disminuir las fracciones intracelulares de FC sugiriendo mecanismos diferenciales de remoción de fosfolípidos de colina.