Hélices anfipáticas de apolipoproteína A-I humana involucradas en la estimulación de la remoción de colesterol en células de ovario de hámster chino ( CHO)

GONZALEZ, M. C.; TOLEDO, J. D.; TRICERRI, A. Y GARDA, H.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas y Congreso Nacional de la Sociedad Argentina de Biofísica (SAB); 2004

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Sociedad Argentina de Inmunología (SAI), Asociación Argentina de Farmacología Experimental (SAFE), Sociedad Argentina de Biología (SABiología), Sociedad Argentina de Biofísica (SABiofísica), SAN y SAF

    La apolipoproteína A-I (apoAI) juega un rol clave en la remoción de colesterol de tejidos periféricos. La interacción de apoAI con sitios específicos de la membrana celular desencadena la movilización de depósitos intracelulares de colesterol como el pool disponible para esterificación por la acil-CoA aciltransferasa (ACAT). Si bien esta proteína está constituída casi exclusivamente por hélices anfipáticas, hemos demostrado anteriormente que su interacción con membranas artificiales es mediada por un dominio central que contiene dos hélices con una distribución particular de cargas (tipo Y) en su cara polar. Un péptido sintético con la secuencia de este dominio (AI 77-120) presentó similar capacidad que apoAI para unirse selectivamente a membranas ricas en colesterol y promover su desorción. Se investigó el rol de estas hélices centrales en la interacción de apoAI con células y su capacidad de desencadenar la movilización del colesterol celular. Se utilizaron cultivos de células CHO para comparar la actividad de remover colesterol y disminuir el pool de colesterol disponible para ACAT de: a) apoAI aislada de suero humano, b) péptido AI 77-120 con la secuencia del dominio central, c) un mutante natural de apoAI con una deleción en el dominio central (AI 0_K107), y d) un mutante cuyas dos hélices centrales fueron reemplazadas por otras dos hélices Y del extremo C (AI H10_H4). Los resultados con AI 77-120 indican que las dos hélices centrales serían suficientes para desencadenar la movilización de colesterol disponible para ACAT y promover la salida de colesterol. El mutante AI 0_K107 fue inefectivo para producir dichos efectos, lo cual podría atribuirse a la eliminación de la carga positiva, o a la disrupción de la orientación adecuada entre caras hidofóbicas e hidrofílicas. Por otro lado AI H10_H4 fue activo para desencadenar estos procesos, sugiriendo que más que una secuencia específica se requeriría una distribución de cargas tipo Y en la cara polar.