La LDL-Ox modifica la sobrevida de macrófagos murinos Raw 264.7

GONZALEZ, M. C.; JUAN D. TOLEDO; ARNAL N.; GARDA, H. A.; TACCONI DE ALANIZ, M.; MARRA C.

Ciudad autónoma de Buenos Aires

Jornada; V Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular de Lípidos y Lipoproteínas; 2012

Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad de Buenos Aires

Estudiamos el efecto de la fracción LDL de plasma humano peroxidada in vitro con Cu++ 5 µM por 4 (L), 8 (M) o 24 (H) h, dializada 12 h (para eliminar Cu residual) y ensayada 24 h a concentr. final 100 µM en cultivos de macrófagos Raw 264.7 con el fin de analizar el efecto de las LDL-Ox sobre la sobrevida celular. El test de azul trypan demostró que el porcentaje de células no viables se incrementó logarítmicamente por exposición a las fracciones progresivamente peroxidadas, mientras que la actividad LDH en sobrenadantes libres de restos celulares solo aumentó en LDL-Ox (H). La actividad específica de mili- y µ-calpaínas fue máxima con la fracción L H y tendió a retornar a valores basales con los otros ensayos (a que te referís con los otros ensayos con las fracciones M y H. Sin embargo, la caspasa-3 aumentó consistentemente con el grado de peroxidación. Estos cambios fueron acompañados de incremento de las actividades de enzimas del sistema de defensa antioxidante: glutathión-peroxidasa, -transferasa y –reductasa, catalasa y superóxido-dismutasa. El glutatión total y el cociente GSH/GSSG disminuyeron progresivamente con la el grado de peroxidación de LDL. Los resultados indican que la sobrevida de Raw expuestos a LDL-Ox depende del grado de peroxidación y que el mecanismo de muerte celular involucra a por lo menos dos sistemas de proteasas. Las células espumosas no serían entonces depósitos quiescentes sino sujetos a remoción por apoptosis. Este modelo experimental podría ser útil para profundizar en la investigación del rol de los macrófagos en la lesión ateromatosa.