Rol de la PLA2 citosólica frente al estrés oxidativo en retinas bovinas expuestas a sobrecarga de hierro.

RODRIGUEZ DIEZ GUADALUPE; GIUSTO NORMA; SALVADOR GABRIELA

Buenos Aires

Jornada; V Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular Lípidos y de Lipoproteínas; 2012

UBA_INIBIBB-INIBIOLP

ROL DE LA PLA2 CITOSÓLICA FRENTE AL ESTRÉS OXIDATIVO EN RETINAS BOVINAS EXPUESTAS A SOBRECARGA DE HIERRO Rodríguez Diez G., Giusto N.M., Salvador G.A. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca (INIBIBB-UNS-CONICET), B. Blanca, Argentina. Email: rodriguezdiez@criba.edu.ar La acumulación de hierro (Fe), junto con el incremento de estrés oxidativo, constituyen un signo patognomónico de la Degeneración Macular relacionada con la Edad (DME). La exposición de retinas bovinas a concentraciones crecientes de Fe2+ (25, 200 y 800 µM), genera un incremento en los peróxidos lipídicos, provocando una disminución en la viabilidad celular y, por lo tanto, constituye un modelo apropiado de DME. Frente al insulto retiniano inducido por Fe la actividad de la fosfolipasa A2 citosólica (cPLA2), medida como la liberación de [14C]ácido araquidónico, disminuyó en la fracción microsomal, mientras que se observó un aumento en la fracción citosólica. Este hallazgo coincidió con un incremento de la localización de la enzima fosforilada (forma activa) en la fracción citosólica, con una mayor asociación de la ciclooxigenasa2 (COX-2) en microsomas y con un aumento en la síntesis de PGE2. Paralelamente, se observó un incremento en la fosforilación de la MAPK ERK en respuesta al insulto oxidativo. Ensayos realizados con U0126 (inhibidor de la MAPKK), demostraron que la activación de ERK estaría regulando la compartimentalización de la cPLA2 durante la injuria oxidativa. Por efecto del insulto oxidativo disparado por Fe, las subunidades p65 y p50 del factor de transcripción NFκB se localizaron mayoritariamente en la fracción nuclear. Asimismo, en presencia de ATK (inhibidor de la cPLA2), los niveles de peroxidación lipídica y la translocación nuclear de NFκB se vieron disminuidas. Nuestros resultados demuestran que la cPLA2 participaría en el daño oxidativo retiniano inducido por Fe, promoviendo la peroxidación lipídica, aumentando la disponibilidad de sustrato para la activación de COX-2 y regulando la actividad transcripcional de NFκB.