LOS BACULOVIRUS (BV) UTILIZAN TLR9 PARA ACTUAR COMO VECTORES DE INMUNIZACIÓN Y GENERAR UNA RESPUESTA CITOTÓXICA CONTRA LOS ANTÍGENOS (Ag) EXPRESADOS EN SU CÁPSIDE

MARÍA INÉS CRESPO; PAULA MOLINARI; GUIDO N. MOLINA; OSCAR TABOGA; GABRIEL MORÓN

Cordoba

Congreso; II Congreso Científico Profesional de Bioquímica 2019.; 2019

Facultad de Ciencias Químicas de la UNC y de la UCC

genomas de ADN doble cadena, patógenos exclusivamentepara insectos. No existe ningún reporte de su patogenicidad envertebrados. Previamente mostramos que BV expresando Agexógenos en su cápside (BVOVA) inducen una fuerte respuestacitotóxica Ag específica in vivo. Los BV ingresan íntegros acompartimentos subcelulares de células dendríticas (DC) y trasun proceso de acidificación mediado por vesículas lisosomales,la cápside viral alcanza el citoplasma.OBJETIVO: Estudiar el mecanismo por el cual los BV estimulanDC para activar linfocitos T citotóxicos (CTL).MATERIALES Y MÉTODOS: DC esplénicas de ratones C57BL/6estimuladas con BVOVA fueron incubadas con el hibridoma decélulas T CD8 B3Z específico para OVA257-264, para evaluar lapresentación de Ag mediada por MHC I. Para estudiar larespuesta CTL in vivo, se inmunizaron ratones vía i.v. conBVOVA. Análisis estadístico: t student.RESULTADOS: La neutralización de la proteína de fusión GP64de la envoltura del BV con un anticuerpo monoclonal inhibió sucapacidad de estimular en DC la activación de LT CD8 in vitro(p<0,01). Dicha activación también fue inhibida cuando las DCfueron tratadas con cloroquina (inhibidor de acidificaciónendosomal) (p<0,05) o lactacistina (inhibidor de proteosoma)(p<0,01). Estos resultados concuerdan con los obtenidospreviamente por microscopía. La respuesta de CTL en ratonesdeficientes en TLR9 inmunizados con BVOVA fue menor que lade ratones wt (p<0,001). Ratones deficientes en el receptor deIFN tipo I pueden desarrollar una respuesta CTL normal(p>0,05).CONCLUSIÓN: Los BV requieren la maduración de losendosomas y la presencia de TLR9 en las DC para generar CTL.La proteína de fusión GP64 mediaría el escape de los BV alcitoplasma dentro de las DC. Allí los BV son procesados por elproteosoma para entrar en la vía de presentación MHC I. Lageneración de CTL mediada por BV no requiere la participaciónde los IFN tipo I.