INVESTIGADORES
SANCHEZ POZZI Enrique Juan
congresos y reuniones científicas
Título:
FOSFATIDILINOSITOL 3-QUINASA (PI3K) PREVIENE LA COLESTASIS POR ESTRADIOL 17ß- GLUCURÓNIDO (E217G): PARTICIPACIÓN DE AKT Y COOPERATIVIDAD CON PROTEÍNA QUINASA C DEPENDIENTE DE CA 2+ (PKCC).
Autor/es:
BOAGLIO, AC; ZUCCHETTI, AE; SÁNCHEZ POZZI, EJ; MOTTINO, AD; CROCENZI, FA; ROMA, MG
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; Reunion Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009
Institución organizadora:
SAIC
Resumen:
E217G induce colestasis aguda y reversible, produciendo
endocitosis de los transportadores canaliculares Bsep y Mrp2 vía
activación de PKCc y PI3K. En este trabajo, indagamos en duplas
aisladas de hepatocitos de rata (DAHR) si el efector cascada abajo
de PI3K Akt está involucrado y si las vías PI3K y PKCc actúan
cooperativamente. La inhibición farmacológica de Akt previno la
disminución por E217G en la acumulación apical de CLF y GSMF,
sustratos fluorescentes de Bsep y Mrp2. El inhibidor de PI3K
wortmanina (WM) y el de PKCc Gg6976 previnieron aditivamente
alteraciones en la acumulación de CLF y GS-MF, así como la
endocitosis de los transportadores Bsep y Mrp2, indicando existencia
de dos mecanismos de acción diferentes, uno probablemente
endocitando transportadores (PKCc) y otro impidiendo su
reinserción (PI3K). Para confirmar esta presunción, y dado que
la reinserción pero no la endocitosis depende de microtúbulos,
evaluamos la participación diferencial de los mismos en la prevención
provista por Gg6976 y WM. Colchicina (desorganizador
de microtúbulos) impidió que WM previniera la disminución de la
acumulación canalicular de CLF y GS-MF inducida por E217G,
mientras que no afectó la capacidad de Gg6976 para prevenir
estas alteraciones, un hallazgo confirmado por inmunolocalización
de Bsep y Mrp2. En el modelo de hígado aislado y perfundido de
rata, Gg6976 previno la disminución inicial del flujo biliar y de la
excreción de glutation (sustrato de Mrp2) y de [3H]-taurocolato
(sustrato de Bsep) inducida por E217G, un proceso que refleja
endocitosis de transportadores. WM, en cambio, aceleró la recuperación
de la función secretora de esos transportadores a la
normalidad, indicativo de una acelerada reinserción de Bsep y
Mrp2. Concluimos que la colestasis por E217G involucra la acción
cooperativa de las vías de señalización PI3K-Akt y PKCc, promoviendo
internalización de transportadores canaliculares (PKCc) y
su posterior retención intracelular (PI3K).