Papel de Ca2+-calmodulina (CaM) en la formación de poros de transición de permeabilidad mitocondrial inducida por tert-butilhidroperóxido: su rol en la generación de estrés oxidativo de origen mitocondrial.

PEREZ, LEONARDO MARTÍN; OCHOA, J ELENA; SANCHEZ POZZI, EJ; ROMA, MARCELO G

Buenos Aires

Congreso; XII Latinoamerican and First Ibero-America Congress of Physiological Sciences. IBERO-ALACF 2006; 2006

Asociación Latinoamericana de Ciencias Fisiológicas

El estrés oxidativo induce apertura de PTPM, con consiguiente escape de electrones y generación de radicales libres en citosol; esto precede la muerte celular por apoptosis o necrosis, dependiendo de la caída de ATP producida. Dado que este fenómeno requiere elevación de Ca2+ mitocondrial y que la mitocondria contiene CaM, comprobamos si esta última media el papel facultativo de Ca2+ en la generación de PTPM por estrés oxidativo. El tratamiento de mitocondrias aisladas de hepatocitos de rata con el agente pro-oxidante tertbutilhidroperóxido (tBOOH, 500 µM) generó apertura de PTPM, evaluada por determinación del swelling mitocondrial (% de caída de OD a 540 nm); este fenómeno fue totalmente bloqueado por ciclosporina A (CsA, 5 µM), un inhibidor de la formación de PTPM.Los antagonistas de CaM W7 (100 µM) y trifluorperazina (TFP, 10 µM) también previnieron totalmente la apertura de PTPM inducida por tBOOH. Un patrón similar de protección se obtuvo cuando PTPM fue inducido por el agregado directo de Ca2+ (100 µM) a la fracción mitocondrial. Se evaluó el impacto de tales manipulaciones sobre la lipoperoxidación inducida por tBOOH a hepatocitos aislados de rata. tBOOH incrementó la lipoperoxidación (+ 723%, p<0.001) y este efecto fue parcialmente inhibido por CsA (~ -30%, p<0.05); esto demuestra que parte del estrés oxidativo generado por tBOOH es de origen mitocondrial, vía formación de PTPM. La inhibición de CaM con W7 o TFP redujo la lipoperoxidación en similar magnitud. Concluimos que las elevaciones de Ca2+ mitocondrial provocadas por estrés oxidativo inducen la apertura de PTPM vía la formación del complejo CaM, provocandoexacerbación del daño lipoperoxidativo de origen mitocondrial.