Modulación por glucagon (G) de la colestasis inducida por estradiol-17ß-glucurónido (E17G)

ZUCCHETTI, AE; BOAGLIO, AC; CROCENZI, FERNANDO A; SANCHEZ POZZI, EJ

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual de SAIC; 2007

SAIC

AMPc previene la colestasis por estradiol 17ß-glucurónido. Los niveles hepáticos de AMPc son regulados por glucagon, por lo que estudiamos la capacidad de esta hormona para proteger de la colestasis. Se utilizó un modelo in vitro de duplas aisladas de hepatocitos (DAHR) para evaluar el efecto de G sobre la alteración por E17G de la función de los transportadores canaliculares Bsep y Mrp2. Se obtuvieron DAHR por perfusión con colagenasa seguida de elutriación. Luego de 5 hs de cultivo, DAHR se incubaron con G (0,4mg/l), seguido de incubación con concentraciones crecientes de E17G (6,25 a 800 µM) o solvente y finalmente expuestas a colil lisil fluoresceína (CLF, sustrato de Bsep) y clorometil fluoresceína diacetato (CMFDA, cuyo metabolito conjugado con glutation, GMF, es sustrato de Mrp2). Por microscopía de fluorescencia se determinó el porcentaje de DAHR que acumularon CLF (acCLF) o GMF (acGMF). Las curvas concentración/respuesta (n=4) se analizaron con el programa Prism 3.0. Se estimaron los parámetros: concentración efectiva 50 (CE50), efecto máximo, efecto mínimo y pendiente de Hill. Resultados (media±ES): E17G redujo, en forma concentración dependiente, acCLF (CE50: 53±1 µM) y acGMF (CE50: 53±2 µM). G tuvo efecto preventivo, desplazando significativamente las curvas (acCLF, CE50: 108±2 µM; acGMF, CE50: 97±1 µM, p<0.05). La presencia de G no afectó los otros parámetros de las curvas concentración/respuesta. Conclusión: G previene el efecto de E17G sobre la función de Bsep y de Mrp2, por lo tanto, se puede hipotetizar que la elevación de niveles plasmáticos de G sería de utilidad terapeútica, ya que se requerirían concentraciones plasmáticas mayores de E17G para producir colestásis.