EVALUACIÓN DE LA PARTICIPACIÓN DEL RECEPTOR DEL FACTOR DE CRECIMIENTO EPIDÉRMICO (EGFR) EN LAS ALTERACIONES COLESTÁSICAS INDUCIDAS POR ESTRADIOL-17ß-D-GLUCURÓNIDO (E17G) EN DUPLAS AISLADAS DE HEPATOCITOS DE RATA (DAHR)

BAROSSO, IR; ZUCCHETTI, AE; MISZCZUK, GS; TABORDA, DR; CROCENZI, FA; SÁNCHEZ POZZI, EJ

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Anual de la SAIC; 2013

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente, demostramos que el Receptor de Estrógenos α (REα) participa junto con PKCα de una vía de señalización activada por E17G que lleva a la internalización de los transportadores canaliculares Bsep y Mrp2. En vista que EGFR es activado por estradiol no conjugado cascada debajo de REα, el objetivo de este trabajo fue evaluar la participación y el potencial papel del EGFR en la alteración colestásica inducida por E17G. La participaciónde EGFR en las alteraciones colestásicas inducidas por E17G se evaluó en DAHR utilizando dos inhibidores específicos diferentes: Tirfostina AG1478 (Tyr) y Cl7387785 (CL). Las duplas fueron pre-tratadas con ICI182,780 (ICI, 1µM), Tyr (150nM) o CL (1µM) durante 15 min y luego fueron tratadas con E17G (100µM) por 20 min. Además, algunos preparados de DAHR fueron coincubados con Tyr o Cl junto con ICI durante 15 min previo a la exposición a E17G. Finalmente, se expusieron a colilglisilamido fluoresceína (CGamF, sustrato de Bsep) o clorometilfluoresceína diacetato (GS-MF, sustrato de Mrp2) para estudiar la actividadde Bsep y Mrp2. Por microscopía de fluorescencia se determinó el porcentaje de DAHR que acumularon CGamF (AVc CGamF) o GS-MF (AVc GS-MF) en sus vacuolas canaliculares. Resultados (% del Control) se expresan como media±ES: Ambos inhibidores previnieron parcialmente la disminución de AVc de CGamF (E17G+Tyr: 80±8%*, E17G+CL: 74±6%*) y GS-MF (E17G+Tyr: 73±4%*, E17G+CL: 74±10%*) inducida por E17G (AVc CGamF:54±2%^; AVc GS-MF: 56±2%^). No se observó un efecto aditivo de la prevención cuando las DAHR se coincubaron con ICI (AVc CGamF: E17G+ICI: 74±5%*, E17G+ICI+Tyr: 82±9%*, E17G+ICI+CL: 68±7%*; AVc GS-MF: E17G+ICI: 70±4%*, E17G+ICI+Tyr: 73±3%*, E17G+ICI+CL: 73±11%*). ^Significativamente diferente de Control (p<0.05), *Significativamente diferente del Control y E17G (p<0.05). Conclusión: El EGFR participaría en las alteraciones colestásicas producidas por E17G por un mecanismo dependiente de la vía PKCα/REα.