CONCENTRACIONES FISIOLÓGICAS DE BILIRRUBINA NO CONJUGADA (BNC) PREVIENEN LA COLESTASIS INDUCIDA POR ESTRÉS OXIDATIVO (EO) EN EL HÍGADO AISLADO Y PERFUNDIDO DE RATA (HAPR)

BASIGLIO, CL; TOLEDO, FD; ARRIAGA, SM; BOAGLIO, AC; OCHOA, JE; SÁNCHEZ POZZI, EJ; MOTTINO, AD; ROMA, MG

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión anual de la SAIC; 2013

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

En duplas de hepatocitos, demostramos que el agente pro-oxidante modelo tert-butilhidroperóxido (tBOOH) produce internalización endocítica de transportadores canaliculares responsables de la formación de bilis (Bsep y Mrp2), por alteración del citoesqueleto de actina. La bilirrubina, considerada actualmente un importante antioxidante endógeno, podría limitar la colestasis por EO, como losugieren resultados in vitro de nuestro grupo. El presente trabajo tiene como objetivo confirmar la capacidad de BNC para limitar las alteraciones de la función secretora biliar inducidas por tBOOH enel HAPR, un modelo que mantiene la integridad del órgano intacto. Se evaluaron cambios temporales en: a) la relación entre glutatión oxidado (GSSG) y total (oxidado+reducido, GSHt) en bilis; b) el flujo biliar; c) la excreción biliar del sustrato de Bsep taurocolato (TC) y d) la excreción biliar del sustrato de Mrp2 dinitrofenil glutatión (GS-DNP). En tejido hepático, se evaluó por microscopía confocal la localización de Bsep y Mrp2 y del citoesqueleto de actina, por doble tinción con anticuerpos primarios y secundarios fluorescentes (para Bsep y Mrp2) y faloidina-Alexa Fluor 568 (para actina). tBOOH indujo un aumento agudo y transitorio en la relación GSSG/GSHt (+167±28%) y una disminución abrupta del flujo biliar (-71±3%), así como de la excreción de TC (-46±12%) y de GS-DNP (-130±37%). La pre-perfusión con BNC (17 μM) previno todos estas alteraciones (p<0,05; n =4). BNC previno casi completamente la desorganización del citoesqueleto de actina y la internalización endocítica de Bsep y Mrp2 inducidas por tBOOH Concluimos que la acción antioxidante de concentraciones fisiológicas de BNC contrarrestan la alteración de la función secretora biliar producida por EO, manteniendo la integridad del citoesqueleto y, consecuentemente, la localización de los transportadores canaliculares, lo cual podría contribuir a limitar la progresión de hepatopatías colestásicas que cursan con EO.