La modulación hormonal de AMPc hepático previene de la colestasis inducida por estradiol 17ß-d-glucurónido en hígado perfundido de rata (HPR).

ZUCCHETTI, AE; BOAGLIO, AC; BAROSSO, IR; LUQUITA, MG; ROMA, MG; CROCENZI, FA; SANCHEZ POZZI, EJ

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2012

SAIC

La acción colestásica de E se basa en la internalización detransportadores como Mrp2 y Bsep desde la membrana canalicular.En duplas de hepatocitos demostramos que moduladoreshormonales de AMPc, un mensajero que promueve inserción detransportadores en membrana, previene los efectos de E pordiferentes mecanismos. Glucagón (G) activó un mecanismo PKAdependientey salbutamol (S) una vía de Epac-MEK-microtúbulodependiente.Estudiamos entonces los efectos de G y S en HPR,donde existe mayor complejidad anatómica y se pueden realizarestudios en función del tiempo. Métodos: En HPR, G (0,1μM) ó S(1μM) se administraron 10min antes de E (3μmol/hígado). Se midióflujo biliar (FB) y velocidad de excreción (VE) de taurocolato (TC,sustrato de Bsep) y de dinitro-fenil glutatión (DNP-G, sutrato deMrp2) por 60min. Por microscopía confocal se evaluó la localizaciónde Bsep y Mrp2. En ambos tratamientos se evaluó el rol delos microtúbulos por administración de colchicina (Col, 1μmol/kg,60 min antes de E). Resultados: G y S previnieron la disminuciónde FB, VETC y VEDNP-G inducida por E. La prevención por Sdependió completamente de microtúbulos mientras que la de G fueafectada solo tardíamente por Col. Bsep y Mrp2 fueron internalizadospor E, colocalizando estos parcialmente Rab11a (marcadorendosomal), efecto revertido totalmente por S y parcialmente porG ya que, algunos transportadores permanecieron colocalizandocon Rab11a luego de su tratamiento. Conclusión: La modulaciónhormonal de AMPc, previenen de la colestasis en modelos conarquitectura hepática conservada, por mecanismos similares alos postulados en estudios in vitro. El estudio temporal revelóque si bien la acción de G no requiere microtúbulos, requeriría detransportadores cercanos a la membrana cuyos niveles se sostienenpor tráfico microtúbulo-dependiente desde el interior celular.