PREVENCIÓN DE LA COLESTASIS INDUCIDA POR ESTRADIOL 17ß- D-GLUCURÓNIDO MEDIANTE MODULACIÓN HORMONAL DE AMPC

ZUCCHETTI, AE; BAROSSO, IR; BOAGLIO, AC; PELLEGRINO, JM; OCHOA, JE; ROMA, MG; CROCENZI, FA; SÁNCHEZ POZZI, EJ

Buenos Aires

Congreso; Congreso Argentino de Hepatología; 2011

Sociedad Argentina de Gastroenterología.

Introducción y objetivos: Estradiol 17ß-D-glucurónido (E17G) es un metabolito colestásico endógenocuyos niveles aumentan durante el embarazo. Previamente demostramos que dicho metabolitoinduce colestasis por internalización endocítica de transportadores canaliculares crucialespara la secreción biliar, tales como la bomba excretora de sales biliares Bsep y el transportador multiespecíficode aniones orgánicos Mrp2. Por otro lado se observó que AMPc previene de la colestasispor E17G. Dado que los niveles hepáticos de AMPc son modulados por hormonas como glucagóny agonistas ß2 adrenérgicos, estudiamos su capacidad para prevenir la colestasis por E17Gy evaluamos los mecanismos involucrados (dependencia de PKA, Epac e integridad de microtúbulos).Materiales y Métodos: Mediante perfusión del hígado de ratas hembra adultas con colagenasa seguidode elutriación, se obtuvieron duplas aisladas de hepatocitos (modelo in vitro polarizado), enlas que se evaluó el efecto protector de Glucagón (Glu) y Salbutamol (Sal, agonista ß2 adrenérgico)sobre la alteración producida por E17G en la localización y función de los transportadoresBsep y Mrp2. La participación de PKA se evaluó con inhibidores específicos (H89, KT5720), lade Epac con el agonista 8-CPT-2'-O-Me-cAMP y el inhibidor PD98059 (bloquea MEK 1/2 cascadaabajo de Epac) y la dependencia de microtúbulos con colchicina. Los efectos de Glu y Saltambién se evaluaron en rata entera (in vivo). Los animales se dividieron en tres grupos: 1) Sal ip2,5mg/Kg PC; 2) L-alanina 0,5 g/Kg PC, ip, en ratas ayunadas (eleva Glu plasmático); 3) Control(solución fisiológica, ip). Luego de 10 min, se inyectó E17G (9 μmol/Kg PC, iv). Finalmente,se midieron flujo biliar, velocidades de excreción de bilirrubina, glutatión (sustratos de Mrp2)y sales biliares (sustrato de Bsep) por 120 min.Resultados: In vitro: Glu y Sal protegieron de la alteración funcional y de la internalización endocíticade Mrp2 y Bsep producida por E17G. La protección por Glu mostró ser PKA-dependientey no requirió la integridad de microtúbulos. Contrariamente la protección por Sal requirió la activaciónde Epac y la integridad de microtúbulos. In vivo: La inyección de E17G indujo una disminuciónaguda del flujo biliar a los 20 min, que se recuperó parcialmente durante el período derecolección (120 min). El tratamiento con alanina o Sal no previno la caída, pero aceleró significativamentela recuperación del flujo biliar a la normalidad. Se observó un comportamiento similarcon la excreción de sales biliares, bilirrubina y glutatión.Conclusiones: El aumento en los niveles de AMPc hepático por Glu y agonistas ß2 adrenérgicosmodula la falla secretora inducida por E17G promoviendo la reinserción de transportadores canalicularesclaves para la secreción biliar. Esta protección se daría por mecanismos diferentes e independientes.La modulación de estas hormonas podría ser de utilidad como estrategia terapéuticaen patologías colestásicas.Interior SUPL 7-28 5/26/11 11:30 AM Página 12