Regulación de la actividad de mTORC1 por glutamina en la célula de Sertoli inmadura.

CENTOLA, CECILIA LUCIA; GORGA AGOSTINA; RINDONE GUSTAVO MARCELO; PELLIZZARI ELIANA HERMINIA; CAMBEROS MARÍA DEL CARMEN; RIERA MARÍA FERNANDA; MERONI SILVINA BEATRIZ; GALARDO MARÍA NOEL LUJÁN

Congreso; XXXI REUNIÓN ANUAL VIRTUAL SOCIEDAD CHILENA DE REPRODUCCIÓN Y DESARROLLO; 2020

El número de células de Sertoli (CS) alcanzado en los periodos proliferativos es crítico ya que determinará la capacidad espermatogénica del individuo adulto. Estudios previos han demostrado que la proliferación de CS es dependiente de la actividad del complejo 1 de mamíferos blanco de rapamicina (mTORC1). Por otro lado, se sabe que la disponibilidad de nutrientes influye en la progresión del ciclo celular y que mTORC1 juega un rol preponderante en el censado de aminoácidos. En particular, la L-glutamina (gln) regula la proliferación de muchos tipos celulares a través de la activación de mTORC1. Sin embargo, se desconoce la influencia de este aminoácido en la regulación de mTORC1 en células de Sertoli que proliferan. El objetivo de este trabajo fue evaluar si la actividad de mTORC1 depende de gln en CS inmaduras. CS obtenidas de ratas de 8 días de edad fueron mantenidas en ausencia o presencia de gln (2.5 mM) y estimuladas con FSH (100 ng/ml). Para evaluar la actividad de mTORC1 se determinaron los niveles de mTOR fosforilado (P-mTOR) por western blot y para evaluar la proliferación celular se determinaron la incorporación de bromodesoxiuridina (BrdU) y los niveles de expresión de ciclina D2 (CCND2) por RT-qPCR. Los resultados se expresan como X±DS de tres experimentos independientes (diferentes letras indican diferencias significativas). Se observó que gln incrementa los niveles de P-mTOR ((2.5mM gln: 2.7±0.3b; 0mM gln+FSH: 3.6±0.4c; 2.5mM gln+FSH: 4.7±0.5d veces de variación P-mTOR/T-mTOR vs. 0mM gln). En cuanto a los parámetros que indican proliferación, se observó que gln aumenta la incorporación de BrdU (0mM gln: 1.4±0.3%a; 2.5mM gln: 4.1±0.6%b; 0mMgln+FSH: 4.0±0.6%b; 2.5mM gln+FSH: 13.0±2.6%c células BrdU positivas) y que coopera con FSH en el estímulo sobre la expresión de CCND2 (2.5mM gln: 0.9±0.1a; 0mM gln+FSH: 1.2±0.2a; 2.5mM gln+FSH: 2.0±0.2b veces de variación vs. 0mM gln). En su conjunto, estos resultados sugieren que gln sería necesaria para la regulación de la proliferación de la célula de Sertoli a través de mTORC1.