¡°Efecto del alfa-ciano-4-hidroxi-cinamato (CHC) sobre la sobrevida de las c¨¦lulas germinales en cultivo.¡±

GALARDO MAR¨ªA NOEL; RIERA MAR¨ªA FERNANDA; PELLIZZARI ELIANA; MERONI SILVINA BEATRIZ; CIGORRAGA SELVA BEATRIZ

Mar del Plata

Congreso; LII Reuni¨®n Anual de la Sociedad Argentina de Investigaci¨®n Cl¨ªnica; 2007

Sociedad Argentina de Investigaci¨®n Cl¨ªnica

Se ha propuesto que el lactato proveniente de las c¨¦lulas de Sertoli (CS) constituye un sustrato energ¨¦tico para las c¨¦lulas germinales (CG) en desarrollo. La producci¨®n de este metabolito est¨¢ altamente regulada por hormonas y podr¨ªa ser liberado y captado por las c¨¦lulas a trav¨¦s de una familia de transportadores de monocarboxilatos (MCTs) recientemente descriptos. El objetivo fundamental de este trabajo fue evaluar el efecto del CHC, un inhibidor general de MCTs, en la sobrevida de CG. Se utilizaron CG (espermatocitos paquit¨¦nicos y esperm¨¢tides redondas) aislados de ratas de 28 d¨ªas de edad. CG se cultivaron en presencia o ausencia de lactato (L) o en presencia de CS provenientes de animales de 20 d¨ªas de edad. Se evalu¨® la viabilidad celular por exclusi¨®n del Trypan Blue y se expres¨® como % de c¨¦lulas vivas. La incubaci¨®n de CG con distintas concentraciones de L o con CS (CG/CS) aument¨® la viabilidad celular a las 48 horas de cultivo (CG: 65%; L0.5mM: 70%, L1.25mM:80%, L5mM:87%, L10mM:87%, L20mM:88%, CG/CS: 98%). Paralelamente, se observ¨® que CG regula la entrada de glucosa a CS (CS: 424¡À70, CS/CG: 978¡À113* dpm 2-deoxiglucosa /¦ÌgADN, X¡ÀDS, n=4,* p<0.01) y la producci¨®n de lactato por CS (CS: 7.86¡À0.26, CS+CG: 16.84¡À0.51*¦Ìg/¦ÌgADN, X¡ÀDS, n=4,* p<0.01). Para evaluar la participaci¨®n de los MCTs, se incubaron las c¨¦lulas en presencia de L con distintas dosis del inhibidor de los MCTs, ¨¢-ciano- 4-hidroxi-cinamato (CHC). El CHC inhibi¨® el efecto del lactato sobre la viabilidad celular (CG: 65%, L10mM: 84%, L10mM+ CHC1mM: 75%, L10mM+CHC10mM: 62%). CHC tambi¨¦n inhibi¨® el efecto del cocultivo con CS sobre la viabilidad celular (CG: 54%, CG/CS: 88%, CG/CS+CHC1mM: 85%, CG/CS+CHC10mM: 52%). Los resultados confirman el papel esencial del lactato en la supervivencia de CG y sugieren que es esencial la actividad de los MCTs para regular la sobrevida de CG. (PIP 5479, CONICET; PICT 25365, ANPCYT).