Interrelación entre la vía PD-1/PD-Ls y la enzima arginasa en células peritoneales en la infección con T. cruzi en ratones.

DULGERIAN LR, STEMPIN CC, GARRIDO VV, CERBAN FM.

La Falda, Cordoba, Argentina

Congreso; Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

Sociedad Argentina de Inmunologia

Durante la fase aguda de la infección con T. cruzi, los ratones presentan una respuesta linfoproliferativa suprimida tanto hacia Ags parasitarios como hacia mitógenos. Como la participación de CTLA-4 durante la infección con T. cruzi ha sido estudiada por otros grupos, nos planteamos profundizar el estudio de este fenómeno analizando el rol que presentan otras moléculas coestimulatorias. Previamente demostramos que receptores que generan señales inhibitorias como PD-1 y sus ligandos (PD-L1 y PD-L2) modificaban su expresión durante la fase aguda de la infección con T. cruzi en células CD3+, CD11c+ y F4/80+ de la cavidad peritoneal. Para continuar con este estudio, evaluamos la expresión de las moléculas de la vía PD-1/PD-Ls en células CD4+ y CD8+ en un modelo de infección con T. cruzi y además, analizamos la relación entre esta vía con la expresión y activación de arginasa. Para ello, ratones BALB/c fueron infectados por vía i.p. con 500 tripomastigotes y se estudió la expresión de PD-1, PD-L1 y PD-L2 en células peritoneales CD4+ y CD8+ a los 4, 7, 14 y 19 días post-infección por citometría de flujo. Observamos un aumento en la relación CD8+/CD4+, una mayor expresión de PD-1 y PD-L1 en la población CD4+ y un aumento significativo de PD-L1 en la población CD8+. Además, cuando se trataron las células de peritoneo in vitro con Acs bloqueantes anti PD-1, PD-L1 y PD-L2 se observó por IFI un aumento de amastigotes intracelulares en las células tratadas con Acs anti PD-L2. Este ligando aumentaba en células F4/80+. Este resultado se correlaciona con la actividad y expresión de la enzima arginasa, ya que el tratamiento con Acs anti PD-L2 de células peritoneales infectadas in vitro aumentó la expresión y la actividad de la misma. Posteriormente, para determinar si estas modificaciones son intrínsecas del T. cruzi o si son mediadas principalmente por citoquinas liberadas in vivo, se infectaron in vitro células peritoneales normales con T. cruzi y se evaluó la expresión de PD-1, PD-L1 o PD-L2 en células CD3+, CD4+, CD8+, F4/80+, CD11c+ y B220+. Los cambios  fueron significativamente menores a los observados en experimentos in vivo, sugiriendo que el T. cruzi necesita un importante microambiente de citoquinas, que es generado in vivo, para poder modular la expresión de PD-1 y sus ligandos. Estos resultados sugieren que la interacción de PD-1 con PD-L2 es importante en la modulación de arginasa y por ello, en los mecanismos que pueden regular la replicación del T. cruzi.