INVESTIGADORES
BALDI Pablo Cesar
congresos y reuniones científicas
Título:
Brucella infecta e induce una leve respuesta inflamatoria en células epiteliales intestinales humanas
Autor/es:
FERRERO, MARIANA; RUMBO, MARTÍN; FOSSATI CA,; BALDI, PC
Lugar:
Mar del Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; LVII Reunión de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Inmunología
Resumen:
En el hombre, una de las formas más comunes de contagio de la brucelosis es el consumo de alimentos contaminados con Brucella spp. Investigamos la capacidad de la cepa lisa B. abortus 2308 y las cepas rugosas B. abortus RB51 y B canis para infectar, replicar e inducir la secreción de citoquinas en las líneas de epitelio intestinal humano Caco-2 y HT-29. Las células se infectaron con 200 bacterias/célula por 16 hs. A las 2, 24 y 48 hs. posinfección (p.i.) se cuantificaron las bacterias intracelulares por ensayos de protección con gentamicina. Todas las cepas se adhirieron e invadieron las células Caco-2 y HT29. La adherencia de las cepas rugosas a células HT-29 fue mayor que la de la cepa lisa (6.5 ±0.7 x107 para B. canis y 5.7 ±0.2 x107 para RB51 vs. 5.6±0.9 x106 UFC/ml para la cepa lisa), y lo mismo ocurrió con la invasión (7.9 ±2.6 x106 y 9.0 ±1.0 x106 vs. 2.4±0.4 x103 UFC/ml). Los resultados fueron similares para Caco-2. La invasión dependió de los microfilamentos y microtúbulos, ya que fue inhibida por citocalasina D y colchicina. Sólo la cepa lisa replicó intracelularmente en HT-29 (UFC aumentaron ~2 log a 48 hs p.i), pero su mutante en el gen virB10 (sistema de secreción tipo IV T4SS-) no logró replicar. En HT-29 la infección indujo una producción moderada de IL-8 (513.0±11.3 pg/ml para B. abortus 2308, 677.5±57.28 pg/ml para B. canis y 1243±14.8 pg/ml para RB51 a 48 hs. p.i.), una baja secreción de GM-CSF (12.61±1.17 pg/ml, 11.37±0.70 pg/ml y 15.06 ± 1.74 pg/ml, respectivamente), pero no indujo MCP-1, IL-1? ni TNF-?. La inducción de citoquinas dependió de la viabilidad bacteriana (B. abortus muerta por calor no indujo citoquinas) pero no del T4SS ni de la replicación intracelular, ya que la cepa mutada en virB10 indujo niveles de citoquinas similares a la cepa salvaje. La infección de Caco-2 no indujo secreción de citoquinas. Esto indica que Brucella puede invadir y replicar en epitelio intestinal humano sin inducir una respuesta inflamatoria importante.
