Perfil de metilación tumoral como biomarcador para cáncer de mama.

MARZESE DM; GAGO FE; OROZCO JH; TELLO O; VARGAS ROIG LM

Mendoza

Jornada; Jornadas de Investigación 2010 de la Facultad de Ciencias Médicas de la Universidad Nacional de Cuyo.; 2010

Facultad de Ciencias Médicas de la Universidad Nacional de Cuyo.

El cáncer es una enfermedad heterogénea y la genética clásica no alcanza para explicar las diferentes manifestaciones de la enfermedad ni el impacto del medio ambiente sobre la carcinogénesis. Los procesos que regulan la expresión de genes sin alterar la secuencia de los mismos son denominados procesos epigenéticos. En las células mamíferas los cambios epigenéticos son heredables, consisten en la metilación del carbono de la posición 5 de citosinas presentes en dinucleótidos CG (llamados islas CpG) y se encuentran concentrados en promotores de genes. La metilación de las islas CpG representa una señal que desencadena un cambio en la cromatina, que impide la transcripción del gen. En un estado normal, la metilación es un mecanismo que regula, entre otros procesos, la diferenciación de tejidos al silenciar ciertos genes en determinados tejidos. Pero cuando la metilación se desregula y afecta genes que no deben ser silenciados, puede iniciarse un proceso patológico. La metilación aberrante de genes supresores de procesos tumorales (GST) provoca un descontrol del ciclo celular, así como la metilación aberrante de genes inhibidores de metástasis, facilita el escape de la célula tumoral. La consecuencia de esta metilación desregulada tiene un efecto comparado al que produce una mutación en la secuencia codificante del gen.  Se ha propuesto que la metilación de los GST es progresiva a lo largo del proceso tumoral detectándose una mayor presencia de GST metilados en líneas celulares. El número de GST que se reportan metilados en cáncer aumenta día a día. Entre éstos encontramos algunos como RASSF1-A, E-Caderina, APC, GSTP1, p16, BRCA1, p14, hMLH1, p53, RB y VHL. Basados en estos datos planteamos que la determinación de alteraciones epigenéticas específicas de un tumor permitiría identificar etapas del proceso carcinogénico, como también establecer el grado o estadío de la enfermedad y que podría aportar información para proponer tratamientos más personalizados. Por otro lado, analizamos la posibilidad de detectar células tumorales en la circulación sanguínea, ya que el perfil de metilación de las células sanguíneas normales no interfiere en la detección del perfil encontrado en el tumor. Esto podría permitir el seguimiento de la enfermedad, la respuesta al tratamiento y la posibilidad de realizar diagnósticos periódicos para detectar casos de recidivas. En definitiva pensamos que el perfil de metilación presente en el tumor puede ser utilizado como un biomarcador de la enfermedad. Para demostrar la influencia de las alteraciones epigenéticas en la carcinogénesis y establecer el perfil de metilación, se analizaron  26 regiones genómicas previamente relacionadas con cáncer humano.  A su vez se estudiaron cambios en el número de copias (ganancias o pérdidas) de 15 regiones más. Se analizó  el perfil de metilación de 14 tumores de tejido mamario, 4 ganglios con metástasis, 6 tejidos no neoplásicos del límite de seguridad quirúrgica y 2 patologías mamarias benignas. Los patrones de metilación y cambios de número de copias de todas las regiones fueron estudiados mediante la metodología molecular MS-MLPA (Methyl Specific – Multiplex Ligation dependent Probe Amplification).