Expresión génica de vitelogenina y metalotioneínas en Palemon argentinus: nueva línea de investigación

DOLAGARATZ CARRICAVUR, ARANTXA; CHIODI BOUDET, LEILA; FERNANDINO, JUAN; GRAZIANO, MAGDALENA; SOMOZA, GUSTAVO; GERPE, MARCELA

San Luis

Congreso; VII Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental; 2018

Sociedad de Toxicologia y Contaminación

Los organismos acuáticos están expuestos a distintas sustancias tóxicas, algunas, con característicasde perturbadores endocrinos (PEs). Palemon argentinus (camarón de agua dulce) se encuentra en lamayoría de las lagunas pampeanas. Estudios previos han demostrado su alta sensibilidad a lacontaminación y por lo tanto, es considerado como un buen biomonitor nativo. Distintos estudios encrustáceos han indicado que la exposición a diferentes concentraciones de estrógenos modifica laexpresión de la vitelogenina (Vtg), precursor de la proteína del huevo o vitelo. Por otro lado, en pecesy en algunos invertebrados, se observó una inhibición de la síntesis de metalotioneínas (MT) ante elaumento de Vtg. Las MT entre sus funciones se caracterizan por actuar como sistema antioxidante. Elobjetivo de este trabajo fue diseñar las herramientas necesarias para evaluar la expresión génica deVtg y MT en P. argentinus.El ARN total fue extraído de hepatopancreas y ovario usando TransZol®, y el ADNc se obtuvo portranscripción inversa utilizando Ultra Script II (Genbiotech). Se diseñaron primers consenso para Vtg,MT y β-actina (gen de referencia) en base a secuencias de crustáceos filogenéticamente relacionados.La amplificación de los genes de interés se realizó por PCR a partir de los ADNc. Los productosobtenidos, con tamaño similar al esperado, fueron purificados y enviados a secuenciar. El análisis delas secuencias obtenidas mediante BLAST permitió verificar que se trataba de los genes de interés.Estos datos permitieron diseñar primers específicos para dichas secuencias como así también paraotros dos genes de referencia: 18S ARNr y factor de elongación 1-α (diseñados a partir de secuenciasdel GenBank para P. argentinus). Estos primers permitirán cuantificar la expresión de Vtg y MT por PCRen tiempo real en P. argentinus y evaluar su potencial uso como biomarcadores de PEs, constituyendouna nueva línea de investigación hasta el momento no explorada en la especie.