INVESTIGADORES
CALVO Daniel Juan
congresos y reuniones científicas
Título:
Potenciación de la actividad de los receptores GABAC por H2O2: Caracterización del mecanismo de acción.
Autor/es:
BELTRÁN GONZALEZ A; GASULLA J; CALVO DJ
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XL Reunion anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biofisica
Resumen:
Potenciación de la actividad de los receptores GABAC
por H2O2: caracterización del mecanismo de acción.
RESERVADO SAB
Andrea N. Beltrán González, Javier Gasulla y Daniel J. Calvo
INGEBI-CONICET. Buenos Aires, Argentina
Como resultado del metabolismo celular
oxidativo y secundariamente a la activación de receptores AMPA y NMDA, en el
sistema nervioso central se generan especies reactivas del oxígeno (ROS), por
ej. peróxido de hidrógeno (H2O2), radical hidroxilo (OH.)
y anión superóxido (O2-.). Las ROS están involucradas en diferentes
vías de señalización celular y fenómenos de estrés oxidativo, particularmente
durante el envejecimiento normal, desórdenes neurodegenerativos y eventos de
isquemia/reperfusión. Diversos receptores de neurotransmisores y canales
iónicos son modulados por ROS. Se han reportado previamente efectos
modulatorios de ROS sobre la neurotransmisión mediada por receptores GABAA, pero las acciones de estos agentes sobre los
receptores GABAC no han sido analizadas. El objetivo del presente
trabajo fue estudiar la regulación de la actividad de los receptores GABAC
por ROS y caracterizar el mecanismo de acción.
Se expresaron receptores homoméricos
GABAρ1 en oocitos de Xenopus laevis y se registraron las
corrientes de cloruro evocadas por GABA mediante fijación de voltaje con dos
electrodos en presencia o ausencia de H2O2. El H2O2
potenció significativamente las respuestas mediadas por receptores GABAρ1.
Los efectos fueron dosis dependiente, reversibles, independientes del voltaje y
dependientes de la concentración de GABA. Las subunidades ρ1 poseen
tres residuos de cisteína, dos extracelulares que forman el cys-loop (C177 y
C191) y uno intracelular (C364). La protección química de los residuos de
cisteína por N-etil-maleimida, agente alquilante de sulfhidrilos permeable a
membrana, abolió la potenciación por H2O2. Además, la
sustitución de la cisteína intracelular por alanina (C364A) por mutagénesis
sitio-dirigida generó receptores insensibles a H2O2,
indicando la existencia de un único sitio de modulación.
Financiado por FONCyT y CONICET.