Potenciación de los receptores rho1 de GABAC por óxido nítrico

GASULLA J; BELTRÁN GONZALEZ A; CALVO DJ

Buenos Aires

Congreso; Congreso de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2011

XL Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Biofisica

Potenciación de los receptores ρ1 de GABAC por óxido nítrico   Javier Gasulla, Andrea N. Beltrán González y Daniel J. Calvo INGEBI - CONICET. Argentina El óxido nítrico (NO) es un mensajero difusible producido en el sistema nervioso central capaz de modificar la actividad de diversos receptores iónicos y canales dependientes de voltaje. En particular, el NO modula a receptores de NMDA y GABAA mediante la modificación de residuos de cisteínas. El objetivo de este trabajo fue examinar el efecto del NO sobre receptores de GABAC. Receptores de GABAC homoméricos ρ1 (GABAρ1R) fueron expresados en oocitos de Xenopus laevis y las respuestas evocadas por GABA fueron registradas electrofisiológicamente en presencia o ausencia de los dadores de NO 1,1-dietill-2-hidroxi-2-nitroso-hidrazina de sodio (DEA) y S-nitrosoglutatión (GSNO). Las respuestas de los GABAρ1R fueron significativamente potenciadas por los dadores de NO en  forma rápida, reversible y dosis dependiente. El scavenger de NO, CPTIO previno estos efectos. Para analizar si el NO actúa modificando las cisteínas del GABAρ1R, se realizaron experimentos de protección de tioles y mutagénesis sitio-dirigida. Cada subunidad del GABAρ1R contiene tres residuos de cisteína: dos extracelulares en el cys-loop (C177 y C191) y una intracelular (C364). La mutagénesis de las císteinas extracelulares produce receptores no funcionels. Sin embargo, la C364 puede ser reemplazada por alanina. La protección de los tioles con reactivos específicos (NEM y MTSEA) previnieron los efectos del DEA sobre los GABAρ1R. Por otro lado, los receptores mutados GABAρ1C364AR fueron potenciados de forma similar a los nativos por DEA. Estos resultados sugieren que el NO potencia al receptor de GABAC a través de la modificación de las cisteínas del cys-loop