Identificación y caracterización de elongasas involucradas en la síntesis de ácidos grasos poli-insaturados en T.brucei y L.major

LIVORE, VERÓNICA; TRIPODI, KARINA E.J.; UTTARO, ANTONIO D.

Mendoza

Congreso; VII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2005

El sistema elongasa o sistema de elongación de ácidos grasos comprende cuatro actividades que en conjunto catalizan la adición de dos unidades de carbono a un ácido graso en su extremo carboxilo. La actividad elongasa propiamente dicha o beta-cetoacyl CoA sintasa corresponde a la primera reacción de condensación. Analizando la vía biosintética de ácidos grasos poli-insaturados en tripanosomátidos, la cual incluye las seis desaturasas descriptas y caracterizadas previamente en nuestro laboratorio, existirían dos posibles elongasas: una delta 6 elongasa actuando sobre los substratos ácido gamma-linolénico (omega 6) y ácido estearidónico (omega 3) y una delta 5 elongasa, usando como substratos los ácidos araquidónico (omega 6) y eicosapentaenoico (omega 3). Mediante la exploración de los tres proyectos genoma de tripanosomátidos se han encontrado numerosas secuencias de posibles elongasas. El estudio filogenético de las mismas agrupa a 12 elongasas de L. major, 3 de T. brucei y 8 de T. cruzi en forma aislada, sin relación directa con elongasas conocidas. Por otro lado, dos elongasas de L.major, una de T.brucei y dos de T.cruzi agruparon junto a elongasas de ácidos grasos poli-insaturados de hongos, musgos y algas. En este trabajo nos propusimos identificar y caracterizar las posibles elongasas de L.major y T.brucei del segundo cluster mediante su clonado y expresión en levaduras. Luego de suplementar los cultivos con los posibles substratos y analizar el nuevo perfil lipídico, se observó que una de las enzimas de L.major tendría actividad delta 6 elongasa. Las secuencias restantes de L.major y T.brucei están más relacionadas filogenéticamente a delta 5 elongasas y su caracterización nos permite completar la vía de biosíntesis de ácidos grasos poli-insaturados en tripanosomátidos