Participación de la quinasa dependiente de calcio y calmodulina (CaMKII) en el estrés inducido por isquemia y reperfusión del miocardio

DI CARLO MN; BECERRA R; MARIANGELO JI; SALAS M; SAID M; MUNDIÑA - WEILENMANN C; VITTONE L

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2015

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS)

Los fenómenos que tienen lugar durante la reperfusión luego de una isquemia prolongada son complejos, pero se considera que dos sucesos son el sello distintivo de este período: el aumento de las especies reactivas del oxígeno (ROS) y la alteración de la homeostasis del Ca2+ intracelular. En ese contexto las condiciones para el correcto plegamiento de proteínas por parte retículo endoplasmático (RE) son desfavorables y la acumulación de polipéptidos mal plegados inician la señalización celular de la vía del estrés del RE o "unfolding protein response". Es de destacar que el incremento de los ROS y el aumento del Ca2+ citoplasmático también favorecen la activación de la CaMKII, que hemos demostrado ejerce un efecto perjudicial durante la reperfusión del miocardio. Objetivos: El objetivo del presente trabajo fue identificar la presencia de estrés del RE a través de la expresión de las proteínas vinculadas a la respuesta del estrés del RE (GRP78 y CHOP) y relacionarlas con la activación de CaMKII.Materiales y métodos: Corazones aislados y perfundidos de rata (Langendorff), se sometieron a 45 min de isquemia global seguida de 15 min de reperfusión, en presencia y ausencia del inhibidor de CaMKII: KN-93. Los controles fueron corazones perfundidos sin I/R (Ctrl). Se evaluó la activación de CaMKII y la expresión de GRP78, por inmunodetección y el nivel relativo de ARNm de GRP78 y CHOP (GAPDH como normalizador) utilizando PCR. Resultados y conclusiones: Luego de 15min del inicio de la reperfusión, la evaluación de CaMKII activada medida a través de su autofosforilación (Thr286), reveló niveles significativamente aumentados en I/R respecto a Ctrl. El estudio de los ARNm de GRP78 y CHOP mostró valores mayores en el grupo I/R: 183,1±33,5% para GRP78 y 208,1±33,7% para CHOP (expresados como porciento de control, p