S-Nitrosilación y S-Glutationilación del receptor de rianodina (RyR2) como mecanismos protectores de las arritmias de reperfusión

HERRERO MA; BECERRA R; ROMÁN B; MATTIAZZI A; SÁNCHEZ G; DONOSO P; MUNDIÑA - WEILENMANN C; VITTONE L; SAID MM

Rosario

Congreso; XXXI Congreso Nacional de Cardiología; 2013

Federación Argentina de Cardiología

Previamente demostramos que durante la isquemia (I) y reperfusión (R) del miocardio, laactivación de la proteína quinasa dependiente de Ca2+ y calmodulina (CaMKII) que a su vez se autofosforila y fosforila otros sustratos como el canal liberador de Ca2+ del retículosarcoplasmático, receptor de rianodina (RyR2), es un mecanismo pro-arritmogénico.Modificaciones inducidas por especies reactivas del oxígeno y nitrógeno, como la S-Glutationilación y la S-Nitrosilación del RyR2 y la oxidación de CaMKII, también regulan la actividad de estas proteínas. Nuestro objetivo fue conocer las modificaciones redox que afectan a RyR2 y CaMKII durante la R miocárdica y su asociación con la aparición de arritmias de reperfusión. Corazones de rata (Langendorff) se sometieron a isquemia global seguida de reperfusión (20/3min) a 37ºC. Se midieron potenciales de acción monofásicos y la presión desarrollada por el ventrículo izquierdo para cuantificar la aparición de latidos prematuros (LP). Se realizaron experimentos en presencia y ausencia de inhibidores de la óxido nítrico sintasa (LNAME 100μM) y de la NADPH oxidasa (Apocinina 10μM, APO). Se congelaron corazones a distintos tiempos del protocolo para la inmunodetección de los cambios redox en RyR2 y CaMKII. Al primer minuto de R encontramos un aumento significativo de 1) la S-nitrosilación del RyR2 (2.3±0.3 U.A. respecto a Preisquemia, n=8), 2) la S-glutationilación del RyR2 (2.0±0.4 U.A. respecto a Preisquemia, n=11), 3) la oxidación de CaMKII (120.7±.8.6% respecto a Presiquemia, n=6), 4) las arritmias (3±1 Preisquemia vs 45±4 LP R1min n=14). El tratamiento con L-NAME y APO disminuyó los niveles de S-nitrosilación (1.2±0.1 R1min p<0.05) y Sglutationilacióndel RyR2 (0.8±0.1 R1min p<0.05) y produjo un aumento significativo del número de LP hasta 65±6 y 58±3 respectivamente (n=5, p<0.05). Los resultados indican que estas modificaciones redox del RyR2 jugarían un rol protector en las arritmias de reperfusión. Dilucidar los mecanismos que conducen a estas modificaciones sería clave para diseñar nuevas estrategias terapéuticas.