Vías de fosforilación del receptor de rianodina (RyR2) durante la estimulación beta-adrenégica en corazón perfundido de rata

FERRERO P,; SAID M,; VITTONE L,; MUNDIÑA-WEILENMANN C,; MATTIAZZI A

Mar del Plata

Congreso; Congreso Conjunto de las Sociedades Biomédicas; 2004

Ha sido demostrado que la actividad del canal liberador de Ca(2+) del retículo sarcoplasmático (RyR2) es modulada por fosforilación. El residuo Ser-2809, según lo descripto, es el sitio de fosforilación por PKA y CaMKII, y se ha observado que la estimulación b-adrenérgica incrementa la fosforilación de RyR2 en Ser-2809 en el corazón entero. Si bien ambas vías, tanto la de PKA como la de CaMKII son activadas en respuesta a agonistas b, aún no se conoce cuál de estas quinasas está involucrada en la fosforilación del sitio Ser-2809 de RyR2 ante el estímulo b-adrenérgico. Para estudiar este fenómeno, se perfundieron corazones de rata con isoproterenol (Iso) en ausencia y presencia de bajo Ca(2+) más nifedipina, para inhibir la vía de la CaMKII. El estado de fosforilación de RyR2 se estudió mediante el uso de anticuerpos contra el sitio fosforilado (PS2809-RyR2) y defosforilado (dePS2809-RyR2). El Iso incrementó la fosforilación 81.31 " 11.56% respecto del control, mientras que en presencia de bajo Ca(2+), este incremento fue significativamente menor (46.56 " 13.29%). La señal del dePS2809-RyR2 se redujo con Iso 67.1 " 6.23% mientras que en presencia de bajo Ca(2+) cayó 50.31 " 6.44% en relación al control. La misma maniobra también produjo una disminución significativa de la fosforilación del residuo Thr-17 de fosfolamban (sitio fosforilado por CaMKII) de 92.5 " 3.7%, en tanto que no alteró la fosforilación del sitio Ser-16 (fosforilado por PKA). Estos resultados muestran que la reducción en la concentración de Ca(2+) es capaz de disminuir la actividad de la CaMKII y que RyR2 es fosforilado en Ser-2809 por CaMKII y PKA en respuesta a estimulación beta-adrenérgica.