El transporte retrógrado de receptores de esteroides requiere del complejo hsp90-inmunofilina

MARIO D. GALIGNIANA, WILLIAM PRATT

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2005

SAIC, SAB, SAI, SAB, SAF, SAN, AAFE

El receptor de glucocorticoides (GR) es citoplasmático en ausencia de hormona y existe como un heterocomplejo con hsp90, hsp70, p23 y una inmunofilina (IMM) de alto peso molecular (FKBP51, FKBP52, PP5 ó CyP-40). Siempre se ha aceptado dogmáticamente que la disociación de hsp90 es requerida para permitir la translocación nuclear de GR. Sin embargo, no hay datos experimentales que apoyen este modelo clásico, por lo que estudiamos el mecanismo molecular para el movimiento de GR. Demostramos que la proteína motora dineína co-inmunoprecipita con complejos GR•hsp90•FKBP52, una asociación que es competida por el extremo N-terminal de FKBP52 sin afectar la interacción de GR•hsp90 con la IMM. Dineína también se recuperó asociada a complejos nativos de GR•hsp90•IMM. La incubación de células con esteroide a cero grado (ocurre la unión de hormona pero no la translocación nuclear del receptor) promueve el reclutamiento de FKBP52 y dineína al complejo. Por otra parte, la incubación de las células con el agente disruptor de hsp90 geldanamicina decrece la velocidad de traslocación de GR en igual magnitud (un orden) que la sobreexpresión del fragmento N-terminal de FKBP52. Los tratamientos no muestran adición o potenciación de la inhibición ya que afectan a la misma maquinaria de tránsito. No obstante, a tiempos largos GR igualmente alcanza el núcleo, sugiriendo la existencia de un mecanismo de transporte independiente del complejo hsp90•IMM menos eficiente, tal que si las distancias a recorrer son más largas como en un axón, y la maquinaria de transporte es alterada, GR se agrega y se degrada vía proteosoma. Concluímos que el complejo hsp90•IMM no se disocia inmediatamente después de unir esteroide y es requerido para el transporte citoplasmático rápido y eficiente de GR, el que utiliza a las dineínas como moléculas motoras para el movimiento retrógrado