Mecanismos moleculares de la diferenciación sexual del hipotálamo: acción del dietilstilbestrol sobre la transcripción del receptor de estrógeno alfa

MONJE L; VARAYOUD J; MUÑOZ DE TORO M; LUQUE EH; RAMOS JG

Mar del Plata, Argentina.

Congreso; LI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006

La expresión dimórfica del REa es crítica para el proceso de diferenciación sexual del área preóptica del hipotálamo (APO). La exposición neonatal a xenoestrógenos puede revertir este dimorfismo, provocando alteraciones reproductivas. Investigamos los mecanismos transcripcionales que median la alteración de la expresión del REa en el APO de hembras expuestas al xenoestrógeno DES. Se trabajó con crías de ratas macho, hembras controles y hembras inyectadas con DES (20 µg/kg sc) desde el día postnatal 1 (DPN1) hasta DPN7. En DPN8 se determinó por RT-PCR en tiempo real la abundancia relativa de transcriptos provenientes de los promotores OS, ON, O, OT, E1 y el ARNm total del gen del REa en el APO. Por inmunohistoquímica se cuantificó el REa en el APO medial y periventricular. En DPN21 se evaluó el patrón de metilación de los promotores activos por análisis de restricción de ADN bisulfitado. En DPN8 las crías macho controles y las hembras inyectadas con DES presentaron una menor expresión del ARNm y la proteína del REa que las hembras controles (p<0.05). Se determinó que en el período neonatal sólo los promotores O, OT y E1 regulan la expresión de REa en ambos sexos. La menor transcripción del REa en los machos se debió al silenciamiento parcial de los 3 promotores (P<0.05), mientras que en las hembras DES se debió al silenciamiento total de los promotores O y OT (P<0.05). El promotor E1 en las hembras DES presentó una mayor actividad transcripcional que en hembras y machos controles (P<0.01). No se observaron diferencias en el patrón de metilación de los promotores entre los grupos experimentales. Los resultados muestran que el DES disminuye la expresión del ARNm del REa en el APO de la hembra haciéndolo igual al de los machos controles. Sin embargo el control transcripcional del REa sigue siendo diferente entre las hembras DES y los machos controles. La represión del gen del REa por el DES no utilizaría un mecanismo de metilación diferencial.