DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE ADN LIBRE EN PLASMA DE PACIENTES CON LEUCEMIA MIELOIDE CRÓNICA MEDIANTE PCR EN TIEMPO REAL

NILVA G; BOSQUIAZZO VL; PADUÁN B; CUESTAS V; VARAYOUD J; RAMOS JG

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013

En respuesta al tratamiento, los pacientes con leucemia mieloidecrónica (LMC) deberían alcanzar remisión hematológica (hemogramanormal), citogenética (ausencia de cromosoma Filadelfia)y molecular (porcentaje de BCR-ABL/ABL ≤ 0,01% en escalainternacional). En los últimos años se ha asociado la presenciade ADN libre en plasma a procesos oncológicos. Nuestro objetivofue establecer el rango de normalidad de la concentración de ADNlibre en plasma y evaluar si dicho parámetro puede utilizarse comoun factor pronóstico de respuesta al tratamiento en pacientes conLMC. Se utilizaron muestras de plasma de 20 individuos clínicamentesanos y de 6 pacientes con LMC al diagnóstico y al cabode diferentes meses después de iniciado el tratamiento. Se aisló elADN libre de cada muestra usando el kit QIAamp DNA Blood Mini(Qiagen) y su concentración total se evaluó por PCR en tiemporeal para la determinación del gen de β-globina. A los pacientescon LMC también se les extrajo una muestra de sangre para lacuantificación de la expresión del gen de fusión BCR-ABL por PCRen tiempo real. El rango de concentración normal de ADN libreen plasma fue de 0.052-0.244 ng/μl. La concentración de ADNlibre en plasma de pacientes con LMC al momento del diagnósticode la enfermedad fue significativamente mayor que los valoresobtenidos en una etapa avanzada de tratamiento (p < 0,05). Laconcentración de ADN libre en plasma de los pacientes con LMCse correlacionó positivamente con la respuesta hematológica (p< 0,05), pero no existió correlación con la respuesta molecular,evaluada por la determinación de la expresión de BCR-ABL. Estosresultados sugieren que la cuantificación del ADN libre en plasmapodría constituir un factor pronóstico sensible que indicaría éxitoterapéutico en la fase crónica de la LMC.