Bionanoparticulas fotosensibilizadoras obtenidas por fotoentrecruzamiento de lisozima por puentes di-tirosina

REY, VALENTINA; L. DORADO; ABATEDAGA, INÉS; FERNÁNDEZ, JUAN M.; MORÁN VIEYRA, F. EDUARDO; BORSARELLI, CLAUDIO D.

SM de Tucumán

Congreso; XXI CONGRESO ARGENTINO DE FISICOQUIMICA Y QUIMICA INORGANICA; 2019

Asociación Argentinade Investigación Fisicoquímica

Introducción: las proteínas son las macromoléculas más abundantes y reactivas enlos sistemas biológicos. Los procesos de ?estrés? oxidativo traen como consecuenciauna gran variedad de modificaciones en la estructura de las proteínas que puedendisparar diversos procesos patológicos. Una de estas modificaciones involucra larecombinación de dos radicales tirosilos (Tyr) para generar el dímero covalente dityrosina(Tyr2), un cromóforo en el péptido capaz de absorber radiación UVB y emitirfluorescencia en el azul, y actuar como fotosensibilizador generando oxígeno singulete(1O2), una de las especie reactivas de oxígeno (ERO), con elevada capacidad difusivay oxidativa de diversas moléculas biológicas, lo que le confiere potencialesaplicaciones terapéuticas o de remediación.Resultados: se estudió el foto-entrecruzamiento de lisozima (LZ, 14.3 kDa, diámetrohidrodinámico dh = 4,11 nm) en buffer fosfato neutro utilizando el complejorutenio(II)tris-bipiridina ([Ru(bpy)3]2+) como fotosensibilizador con luz LED azul (462±14nm) en presencia de S2O82+ como donante electrónico sacrificial, para la generaciónprimaria de Tyr y por recombinación (Tyr2) (Figura 1A). La fotorreacción genera laprogresiva formación de oligómeros proteicos covalentes, los cuales se purificaronmediante una columna cromatográfica de intercambio catiónico HiTrap SP/HP y secaracterizaron mediante SDS-PAGE y dispersión de luz dinámica (DLS) (Figura 1B y1C), identificando la formación de bionanopartículas (dh = 6-14 nm) con PM múltiplosde LZ monomérica (ej: LZ2, LZ3,?, LZ6). Estas bionanopartículas al ser irradiadas conUVB (320-370 nm) generan 1O2 con un 20% de rendimiento cuántico.