Nanopartículas de plata estabilizadas con lisozima. Análisis de los cambios conformacionales proteicos por interacción con la superficie metálica

V. REY; M.E. GRAMAJO FEIJO; C.D. BORSARELLI

Villa Carlos Paz

Congreso; XX CONGRESO ARGENTINO DE FISICOQUIMICA Y QUIMICA INORGANICA; 2017

Asociación Argentina de Investigación Fisicoquímica

La nanotecnología como ciencia que se enfoca en el diseño, caracterización, producción y aplicación de dispositivos que, mediante una manipulación controlada de nanopartículas (NPs), produce sistemas con características nuevas o superiores, es un área de creciente interés y desarrollo. En este contexto, las NPs metálicas (NPM) constituyen un pilar fundamental para desarrollo de nano y micro-objetos funcionales. Dentro de los metales más utilizados para la fabricación de nanomateriales, la plata (Ag) ha ganado mucho interés debido a su conductividad, estabilidad química, actividad catalítica y antibacteriana.Como objetivo general de este trabajo se propone obtener NPM empleando moléculas sensibilizadoras que por absorción de radiación UV-Vis producen especies reductoras de cationes metálicos, en presencia de biomoléculas estabilizantes inocuas, y su posterior caracterización mediante técnicas espectroscópicas y de imagen. Específicamente se llevó a cabo la fotoreducción del NO3Ag por excitación de Igarcure-2959 (I-2959)1,2 en presencia de lisozima (LZ) como estabilizante, y la caracterización de la interacción NPM-LZ mediante UV-Vis, FTIR; fluorescencia estática, dicroísmo circular (DC), Raman. Se evaluó la de estabilidad de las NPs obtenidas y se realizó la caracterización de su tamaño y forma mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM) y por Dispersión de Luz Dinámica (DLS).ResultadosEl análisis por TEM de los AgNPs estabilizadas con LZ (AgNP@LZ) demostró que se forman nanoesferas monodispersas de  6 nm de diámetro, cuyo tamaño es dependiente de la concentración de LZ. Las medidas de los radios hidrodinámicos obtenidos mediante DLS permitieron estimar el tamaño de la corona LZ que estabiliza el núcleo metálico. Los espectros de fluorescencia con λ excitación a 280 nm muestran que la λ del máximo de emisión, característico de los residuos de triptófano (Trp) de la LZ libre (340 nm) se desplaza al azul, indicando que la interacción de LZ con las AgNPs modifica su entorno lo cual es atribuible a un cambio conformacional de la LZ adsorbida, evidenciado por espectroscopia Raman y DC que muestran que LZ experimenta cambios de su estructura secundaria debido a perdida de estructura -hélice, que se traduce en una pérdida de su estructura globular nativa.ConclusionesSe pudieron fotosintetizar AgNP@LZ, evidenciando los cambios conformacionales que sufre la LZ cuando interacciona con la superficie metálica, relacionados con su pérdida de actividad enzimática