El factor de crecimiento insulínico tipo 1 (IGF-1) regula la capacidad migratoria de células gliales de Müller mediante activación de Metaloproteinasa-2 (MMP-2).

LORENC VE; ORTIZ S; CHIABRANDO GA; SANCHEZ MC

Bs As

Congreso; VI Congreso Nacional de la Asociación en Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO); 2009

Objetivos: IGF-1 tiene una activa participación durante el desarrollo vascular retinal así como en la patogénesis de la Retinopatia de la Prematurez (ROP) y la Retinopatía Diabética Proliferativa (RDP). En estas patologías, se conoce que las células gliales de Müller (CM) cumplen un rol importante al producir el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) y secretar MMPs que participan en la proteólisis extracelular durante la retinopatía neovascular. Sin embargo, la función que cumpliría IGF-1 durante este proceso no está lo suficientemente esclarecida. En este trabajo evaluamos el efecto de IGF-1 sobre la regulación de MMPs y la capacidad migratoria de células humanas de Müller inmortalizadas (MIO-M1). Materiales y métodos. Sobrenadantes de cultivos de células MIO-M1 estimuladas con  IGF-1 (10 nM) 4, 6 y 8 hs, fueron analizados por zimografía (1,5 mg/ml) mientras que los lisados celulares fueron utilizados en ensayos de Western blot (WB) para MMP-2 activa. Para analizar las vías de señalamiento intracelulares, las células en SFB al 0,5% fueron estimuladas con IGF-1 durante diferentes intervalos de tiempo (1 a 60 min). Luego, los extractos proteicos fueron analizados por WB para ERK1/2 y Akt fosforilados. Finalmente la migración celular fue evaluada, sobre placas de cultivo adsorvidas con diferentes proteínas de matriz, usando un microscopio Nikon TE 2000U. Resultados. Mediante zimografía se observó que IGF-1 induce un incremento en la actividad de proMMP-2, mientras que MMP-2 activa fue disminuida en función del tiempo de estímulo. Por ensayos de WB observamos que la MMP-2 activa aumentó, a nivel proteico, en los lisados celulares mientras que disminuyó en los sobrenadantes de cultivo coincidente con lo obtenido por zimografía. También por WB demostramos que IGF-1 produce en CM una rápida activación de MAPK-ERK1/2 y PI3K/Akt, indicando que estos eventos de transducción de señales están mediados por receptores de IGF-1. Finalmente, la regulación de MMP-2, por IGF-1 fue acompañada por un incremento en la motilidad celular sobre colágeno y laminina. Conclusión. Estos resultados demuestran que IGF-1 regula la actividad de MMP-2 incrementando la capacidad migratoria de las células gliales de Müller en un mecanismo que sugiere ser dependiente de receptores de IGF-1 expresados en estas células.