Transporte y utilización de hemo en la mitocondria de Trypanosoma cruzi

SIMÓN M. MENENDEZ BRAVO; CELESTE BUCHENSKY; BRIAN SUAREZ MANTILLA; ARIEL M SILBER; JULIA A CRICCO

Ascochinga, Córdoba, Argentina

Otro; XXIV Reunión Científica Anual, Sociedad Argentina de Protozoología; 2010

Sociedad Argentina de Protozoología

Transporte y utilización de hemo en la mitocondria de Trypanosoma cruzi Simón Menendez Bravo1, Celeste Buchensky1,2, Brian Suarez Mantilla3, Ariel M. Silber 3 y Julia A. Cricco1,2 1Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario (IBR) CONICET-UNR. 2Área Biofísica, FCByF, UNR, Argentina. 3Departamento de Parasitología, Instituto de Ciências Biomédicas, Uiversidade de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil. menendezsimon@gmail.com El grupo hemo cumple un rol fundamental en muchos procesos celulares, es sintetizado a través de una ruta de múltiples pasos e involucra intermediarios definidos que están altamente conservados a través de la evolución. Trypanosoma cruzi, así como otros tripanosomátidos presenta un ciclo de vida complejo y requiere, entre otros, hemo como cofactor esencial. Se ha demostrado que T. cruzi, carece de una ruta de síntesis para este cofactor. Estos parásitos, adquieren hemo del entorno extracelular que posteriormente incorporan en hemoproteínas. Muchas de estas son ortólogas a las de otros organismos eucariotas e intervienen en rutas metabólicas esenciales. Si bien la vía de incorporación y distribución de hemo hacia la mitocondria no ha sido elucidada en este organismo, hemos identificado las enzimas responsables para la biosíntesis de hemo A (cofactor esencial del complejo citocromo c oxidasa de células eucariotas y también de algunos organismos procariotas). Además, estamos interesados en el estudio del transporte de hemo a través de las membranas mitocondriales. Hemos identificado en T. cruzi una secuencia codificante (cds) con alta homología al transportador mitocondrial ABCB6 (posible responsable del transporte de CPIII y hemo en células de mamíferos), que denominamos TcABCB6 y que se encuentra conservada en el resto de los tripanosomátidos. Mediante ensayos de qRT-PCR hemos analizado su expresión en los distintos estadíos del ciclo celular de T. cruzi. Se observó una mayor acumulación de su ARNm en epimastigotes, mientras que en amastigotes esta fue mínima. Para evaluar si esto se correlaciona con el nivel proteico en los distintos estadíos y determinar localización subcelular estamos trabajando en la obtención de anticuerpos específicos para este transportador. A partir de los resultados obtenidos en el estudio de la expresión de los genes que codifican para las enzimas involucradas en la biosíntesis de hemo A (TcCOX10 y TcCOX15) y del transportador mitocondrial TcABCB6 mediante la técnica de qRT-PCR se observó que el perfil de acumulación de ARNm para estos genes es similar. Esto indica la existencia de una relación entre las rutas de transporte mitocondrial de hemo y la biosíntesis de hemo A, que a su vez reflejarían los distintos requerimientos energéticos del parásito a través de su ciclo de vida.