La secreción de metalo-beta-lactamasa Nueva Delhi en vesículas de membrana externa es capaz de proteger poblaciones bacterianas circundantes durante co-infecciones en Galleria mellonella

MARTÍNEZ, MELINA; LISANDRO JAVIER GONZALEZ; SEMORILE, LILIANA C.; MAFFIA, P.C.; ALEJANDRO JOSE VILA

Buenos Aires

Congreso; XV CONGRESO ARGENTINO DE MICROBIOLOGÍA - CAM 2019; 2019

ASM

La aparición y la diseminación mundial de las bacterias Gram-negativas productoras de carbapenemasas ha generado una gran preocupación en lo referente a la salud pública. Las metalo-β-lactamasas (MBLs) representan la familia más grande de carbapenemasas, y sus genes se han diseminado en todo el mundo. Entre ellas, la metalo-β-lactamasa Nueva Delhi (NDM-1) ha mostrado la diseminación geográfica más rápida y más amplia, encontrándose no solo en aislamientos clínicos, sino también en bacterias del medio ambiente. Mientras que la mayoría de las MBLs son enzimas periplásmicas solubles, la NDM-1 está anclada a la membrana externa bacteriana. Esta localización celular atípica favorece la secreción selectiva de NDM-1 en vesículas de membrana externa (OMVs). OBJETIVO: evaluar en un modelo de infección in vivo de larvas de Galleria mellonella (GM) si la presencia de OMVs con NDM-1 es capaz de brindar resistencia a cepas sensibles a carbapenemes en infecciones con Escherichia coli y en co-infecciones de E. coli que secreta OMVs con NDM-1 y Pseudomonas aeruginosa sensible. METODOLOGÍA: Se construyeron cepas de E. coli de igual resistencia a carbapenemes pero que secretan cantidades variables de NDM-1 en OMVs (una variante que expresa NDM-1 salvaje, una variante que secreta NDM-1 soluble en periplasma y una tercera variante hiperproductora de OMVs). Para probar la protección durante una co-infección se utilizó la cepa P. aeruginosa PAO1 sensible a carbapenemes. Se realizaron ensayos de sobrevida y recuento de UFC en un modelo estandarizado de infección en larvas de GM. RESULTADOS: NDM-1 unida a vesículas otorgó protección a la cepa sensible al antibiótico, permitiendo la infección y muerte de las larvas. Las curvas de muerte de GM mostraron que la encapsulación en vesículas protege a la NDM-1, prolongando y favoreciendo la resistencia al carbapeneme. La supervivencia de P. aeruginosa sensible aumentó 5 log durante la co-infección con E. coli que expresa NDM-1 en OMVs, 4 log con la cepa hiperproductora de vesículas y sólo 3 log con la variante de E. coli que expresa NDM-1 en periplasma.