IDENTIFICACION DE SITIOS DE RECONOCIMIENTO DE RECOMBINASAS SITIOESPECIFICA XERC/D EN EL PLASMIDOMA DE ACINETOBACTER BAUMANNII: ROLES EN LA PLASTICIDAD PLASMIDICA Y DISEMINACIÓN DE RESISTENCIA A CARBAPENEMES

REPIZO GUILLERMO D.; CAMERANESI MARÍA M.; VIALE ALEJANDRO M; LIMANSKY ADRIANA S.

Buenos Aires

Congreso; SAMIGE 2019; 2019

SAMIGE

Introducción y Objetivos:El sistema Xer de recombinación sitio-específica (RSE) bacteriano permite la resolución de dímeros del cromosoma formados durante la replicación, y es cooptado por diversos elementos genéticos móviles (EGM) para su estabilidad y diseminación. Módulos portadores de genes blaOXA portando resistencia a carbapenemes (CpmR) flanqueados por sitios de reconocimiento de recombinasas XerC/XerD son frecuentes en plásmidos del patógeno nosocomial Acinetobacter baumannii (Aba). Nosotros reportamos recientemente que algunos de esos sitios en plásmidos de la cepa clínica Ab242 aislada en hospitales de Rosario forman pares activos mediando RSE 1 . Aquí, nosotros caracterizamos mediante métodos bioinformáticos los distintos sitios XerC/D presentes en el plasmidoma de Aba con énfasis en aquellos portadores de blaOXA, a fin de evaluar su rol en la adquisición y diseminación de CpmR en la población clínica de Aba.Materiales y Métodos:Construimos una base de datos de 215 plásmidos de Aba incluyendo a la cepa clínica local Ab825. En los mismos buscamos sitios XerC/D empleando una secuencia patrón de 28 nucleótidos reportada previamente en la cepa Ab242 1 utilizando Fuzznuc. A partir de este análisis inferimos un consenso mediante WebLogo.Resultados:Este análisis mostró 376 sitios XerC/D en 112 plásmidos, el 52% de los analizados. La frecuencia de sitios por plásmido varió entre 1 y 13, teniendo el 41% de los mismos 3 sitios por molécula. El logotipo obtenido evidenció prevalencia de ciertos nucleótidos en posiciones determinadas, permitiendo proponer una secuencia XerC/D consenso para el plasmidoma de Aba. Los plásmidos con sitios XerC/D poseen tamaños menores a 50 kpb y no son conjugativos, en contraste con aquellos carentes de sitios que oscilan entre 50 y 150 kpb y presentan una maquinaria conjugativa. Esto sugiere que los últimos median la diseminación inter532 XIV Congreso Argentino de Microbiología General (XIV SAMIGE) celular de genes de resistencia mediante conjugación, mientras que en los primeros este proceso dependería del intercambio intra-celular previo mediado por RSE de plataformas portadoras de genes de resistencia flanqueadas por sitios XerC/D. En apoyo a esta hipótesis detectamos, mediante experimentos de transformación de cepas modelo de Acinetobacter, co-integrados entre diferentes plásmidos presentes en cepas clínicas de Aba. Dichos co-integrados involucraron nuevos pares de sitios XerC/D, generando plataformas previamente no observadas portadoras de genes blaOXA de resistencia a Cpm.Conclusiones:Nuestro análisis bioinformático detectó asimismo que plásmidos menores a 50 kpb, incluidos los de Ab825 portadores de CpmR, contienen múltiples sitios XerC/D flanqueando módulos funcionales así como asociados a entornos genéticos específicos. La detección de un par XerC/D activo en plásmidos recombinantes portadores de blaOXA sugiere así que dichos sitios participan en RSE contribuyendo a la evolución plasmídica y a la diseminación de la resistencia antimicrobiana. 1Cameranesi et al., 2018. Front. Microbiol. 9:66 (https://doi.org/10.3389/fmicb.2018.00066)