Influencia del estado redox de la cadena de transporte de electrones cloroplástica en el desarrollo foliar

MAYTA, M; SAENZ, M; LODEYRO, A; CARRILLO, N

Rosario

Congreso; XIII Jornada de Ciencia y Tecnología 2019; 2019

Área de Ciencia, Tecnología e Innovación para el Desarrollo de la Universidad Nacional de Rosario

El tamaño final de las hojas está determinado por los procesos de proliferación y expansión celular. Varias proteínas que controlan la homeostasis de las especies reactivas del oxígeno (ERO) en la pared celular tienen un papel en la regulación de la expansión celular durante el crecimiento foliar. En las hojas, la mayor parte de las ERO provienen de los cloroplastos. La influencia de estas moléculas en procesos celulares está regulada por un equilibrio entre su producción y su eliminación por los sistemas antioxidantes.Tanto las ERO cloroplásticas como el estado redox de la cadena fotosintética de transporte de electrones (CFTE) han sido relacionados con la señalización retrógrada, aunque se desconoce el mecanismo molecular. El principal objetivo de este trabajo es investigar los mecanismos involucrados e identificar los componentes de la CFTE implicados en el desarrollo foliar, utilizando para ello plantas transgénicas que expresan flavodoxina bajo el control de promotores constitutivos.Las Fld son transportadores electrónicos isofuncionales con ferredoxina (Fd), y contienen FMN como grupo prostético en lugar del centro Fe-S de las Fd.Fld se encuentra ausente en plantas, sin embargo, la expresión constitutiva de una Fld de Anabaena en cloroplastos de plantas de tabaco permitió obtener plantas con tolerancia aumentada a distintos tipos de estrés ambiental, aunque el tamaño de sus hojas era levemente menor en condiciones de crecimiento normales.Por la técnica de floral dip se obtuvieron plantas transgénicas de Arabidopsis thaliana con constructos de Fld bajo el control de distintos promotores. De la misma manera se realizaron como control construcciones análogas con el gen reportero de la b-glucuronidasa (GUS).Por un lado, se trabajó con dos promotores inducibles por estrés, PEC y PEC:I, que difieren en la fuerza de expresión. Las construcciones con el gen reportero permitieron poner a punto las condiciones de inducción del promotor con NaCl y con ácido abscísico (ABA) tanto en plántulas de 15 días como en discos de hoja de plantas adultas. Estas mismas condiciones se utilizarán para la inducción del promotor para la expresión de Fld en condiciones de estrés.Por otro lado, se obtuvieron plantas transgénicas que expresan Fld, o el control con GUS, bajo el control de promotores que se expresan en los distintos estadíos del desarrollo foliar. En todas las plantas se analizará el tamaño foliar, número y tamaño de las células de las hojas, y se confirmará la expresión de Fld mediante ensayos de Western blot.