Cuádruplex de Guanina en el control de la expresión génica en el desarrollo

FEDERICO PASCUTTI; NORA B CALCATERRA; ALDANA DAVID; PABLO ARMAS

Buenos Aires

Workshop; Workshop de Biología Celular y Molecular del ARN; 2018

CLUB DE RNA DE BUENOS AIRES

Los ácidos nucleicos pueden adquirir estructuras no convencionales, entre las cuales se encuentran los cuádruplex de Guanina (G-quadruplex o G4). El ADN puede plegarse transitoriamente como G4, influyendo en el control de la expresión génica y la integridad del genoma. Aunque la formación y función de los G4 se ha demostrado in vitro e in cellulo, su relevancia biológica in vivo ha sido poco explorada. Para abordar esto, utilizamos estrategias in silico para identificar secuencias putativas para formación de G4 (PQS) conservadas dentro de los promotores proximales de genes regulados en el desarrollo. Mediante experimentos in vitro e in cellulo determinamos la formación de los G4 y su función reguladora de la transcripción. Para evaluar el papel de los G4 en la transcripción de genes in vivo, utilizamos como modelo el desarrollo embrionario del pez cebra. Además, estudiamos la influencia de una proteína con función en el desarrollo craneofacial y con actividad desestabilizadora de G4 en la transcripción de uno de los genes en estudio. Nuestros resultados indican que los G4 cumplen una función in vivo en la regulación transcripcional modulando la expresión génica durante el desarrollo embrionario y siendo regulados por la acción de proteínas. Finalmente presentamos un estudio in silico y una estrategia in vivo para la identificación y el análisis de la función de G4 de ARN en precursores de microARNs como posibles reguladores de su biogénesis en el desarrollo embrionario.