Pseudomonas asiatica Y Pseudomonas monteilii PRODUCTORAS DE VIM-2: TAXONOMÍA MOLECULAR Y PLATAFORMA GENÉTICA DE RESISTENCIA

DIAZ SUSANA; VIALE ALEJANDRO M.; BROVEDAN, MARCO A.; LARINI S; MARCHIARO PATRICIA; PEREZ JORGELINA; LIMANSKY ADRIANA S.

Buenos Aires

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología (CAM 2019); 2019

Pseudomonas grupo putida incluyen numerosas especies ambientales, que suelenser patógenas oportunistas para el hombre. Algunas cepas exhiben resistencia (R) a múltiples antimicrobianos incluyendo la producción de metalo-ß-lactamasas (MßLs), siendo este un mecanismo de R de implicancia epidemiológica. Los objetivos fueron identificar taxonómicamente 2 aislamientos clínicos tipificados inicialmente como P. putida; y evaluar comparativamente sus plataformas portadoras de MßLs, con otras caracterizadas previamente en especies del grupo. Se incluyeron 2 aislamientos clínicos de P. putida (según VITEK-2C) de pacientesinternados en 2017, productores de MßL. La identificación basada en la filogenia de secuencias concatenadas de gyrB y rpoD incluyó secuencias de aislamientos caracterizados previamente en nuestro laboratorio (n: 13), y cepas tipo (n: 19). La relación clonal entre aislamientos de cada especie se efectuó mediante PCR con oligonucleótidos degenerados. El gen codificante de MßL y su entorno fueron identificados mediante PCR/secuenciación; y la localización genómica mediante ensayos de transferencia de ADN.La evaluación de los marcadores taxonómicos 16S RNA, gyrB y rpoD, versus gyrB y rpoD mostró concordancia. Estos últimos permitieron identificar los 2 aislamientos como P. asiatica, P.a y P. monteilii, P.m. La identidad clonal de cada aislamiento con cepas adicionales de cada especie mostró 3 clones para P.a (P.a1 y P.a2 de la colección de cepas; y P.a3 del nuevo aislamiento); mientras que 2 clones diferentes para P.m (P.m1 de una cepa de colección; y P.m2 para otra cepa de colección y el aislamiento aquí incluido). El análisis mostró que P.a3 y P.m2 estudiados aquí contienen blaVIM-2, en un integrón clase 1 clásico (In/C) en P.a3, mientras que un integrón inusual (In/I) incompleto en su módulo de transposición en P.m2. La comparación de las plataformas con blaVIM-2 en los 3 clones de P.a mostró diversidad de arreglos, dado que P.a1 y P.a2 contienenIn/I completos (Tn6335 y Tn6336, respectivamente), sólo diferentes en un casete de R; y de localización plasmídica. Por su parte, P.a3 contiene blaVIM-2 en un In/C de probable localización cromosomal según ensayos de transferencia. Similar análisis mostró el Tn6335 para P.m1, e idéntico In/I incompleto (con región variable diferente al del clon P.m1) para ambos aislamientos del clon P.m2; en todos los casos de portación cromosomal.Así, especies de P. grupo putida muestran diversidad de plataformas con blaVIM-2: In clásicos como inusuales, en clones de P.a; mientras que In/I, completos o incompletos, en P.m. La observación del Tn6335 en P.a1 (en plásmido) y en P.m1 (en cromosoma) sugiere eventos de transferencia horizontal de blaVIM-2 entre diferentes especies. Estos resultados agregan evidencia de que este grupo constituye un reservorio de genes R y sugieren un dinámico intercambio de blaVIM-2 entre diferentes especies del mismo.