IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Del gen al plegamiento usando técnicas rápidas de RMN (Conferencia premio SAB)
Autor/es:
RASIA RM; BOLOGNA NG
Lugar:
La Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; XXXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biofísica
Resumen:
La identificación de construcciones de proteínas que permitan la determinación de su estructura por cristalografía o RMN es uno de los principales cuellos de botella en biología estructural. El estudio de ensamblajes moleculares necesita frecuentemente la optimización de condiciones para los componentes independientes y la reformación posterior de complejos in vitro. De la misma manera, el estudio de proteínas modulares suele requerir la excisión y estudio independiente de cada dominio.Hemos puesto a punto un método simple de expresión, marcado y purificación de construcciones de proteína (de hasta 80 kDa), combinado con evaluación rápida por espectroscopia de RMN. El método se puede utilizar de manera manual o automatizada y ofrece una forma eficiente de identificar y optimizar construcciones de proteína. A las construcciones seleccionadas se les asigna el esqueleto y se obtienen restricciones estructurales direccionales (RDC) en corto tiempo utilizando métodos de RMN y herramientas de análisis optimizados. Los datos obtenidos se utilizan directamente para calcular el plegamiento de las proteínas utilizando el programa Rosetta RMN.El procesamiento de microARNs en plantas es guiado por varias proteínas multidominio. La estrategia descripta se aplicó a la caracterización estructural de la proteína multidominio HYL1 de A. thaliana y al estudio de su interacción con el ARN.