ANÁLISIS DEL PERFIL DE PROTEÍNAS Y SUS MODIFICACIONES POST-TRADUCCIONALES DE PLANTAS JÓVENES DE Arabidospis thaliana SOMETIDAS A ESTRÉS HÍDRICO

SCARPECI TELMA ELEONORA; VALLE ESTELA MARTA

Rosario

Congreso; XVII Congreso y la XXXV Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2015

En este trabajo se presentan resultados de unanálisis de proteómica bottom?uputilizando plantas de Arabidopsisthaliana Col-0 de 21 y 36 días crecidas en condiciones normales y plantasde 36 días sujetas a un tratamiento de deficiencia hídrica controlada. Losextractos proteicos fueron analizados con un equipo nanoLC-MS/MSVelos Orbitrap (Thermo Fisher). Las proteínas se identificaron utilizando losprogramas Mascot y Scaffold y se seleccionaron aquellas proteínas quetenían una probabilidad mayor a 99% de que las mismas hayan sido identificadascorrectamente. Con este criterio, el número total de proteínas identificadas fue1002 que fueron luego clasificadas en categorías funcionales utilizando elprograma MapMan. El conjunto de proteínas detectadas en cada una de lasmuestras fueron analizadas utilizando un diagrama de Venn para determinar lasrelaciones entre los distintos conjuntos de datos. En este análisis se observóque 634 proteínas eran comunes a las tres muestras, 17 y 21 proteínas sedetectaron sólo en Col-0 de 36 días control y sequía respectivamente y 22proteínas fueron únicas para Col-0 de 21 días. Se analizaron además lasmodificaciones post-traduccionales en distintas proteínas y se observó que la enzima ribulosa bisfosfatocarboxylasa/oxygenasa activasa (RCA) presentóun claro patrón diferencial en estas modificaciones al comparar las tresmuestras. Los niveles de oxidación de las metioninas presentes en RCA fueronmayores en plantas de 21 que en las de 36 días (condiciones control y sequía).Esto coincide con lo informado por otros grupos de investigación, donde seobservó que el grado de oxidación de las proteínas primero aumenta con la edadde la planta seguido por una abrupta caída en estos niveles que comienza cuandola planta tiene 20 días. De las 20 metioninas que existen en la secuencia deRCA, 6 están oxidadas sólo en Col-0 de 21 días, 1 en Col-0 de 21 días y Col-0de 36 días sometidas a sequía y 2 metioninas están oxidadas en las tresmuestras. La oxidación de metionina cambia la naturaleza química del residuo,lo cual podría tener un gran impacto en la función de la proteína. Este hecho,junto a la naturaleza reversible de la oxidación, hace de esta modificación dela metionina de una importancia regulatoria significativa. Por otro lado, en RCAse observaron diferencias entre las muestras analizadas en el patrón defosforilación: en Col-0 de 21 días se encontró una treonina fosforilada y enCol-0 de 36 días control se encontró una tirosina fosforilada. La fosforilación reversible deproteínas es un importantemecanismo de regulación. Este trabajo pone en evidencia los cambios que ocurrencon la edad de la planta y bajo diferentes condiciones de crecimiento en elperfil de proteínas y en el patrón de modificaciones post-traduccionales, lascuales podrían tener un papel importante en la actividad de la proteína.