Descifrando el rol putativo de la proteína HIGH MOBILITY GROUP B (HMGB1) de Trypanosoma cruzi en inflamación.

PERDOMO, VIRGINIA; TAVERNELLI, LUIS; OCHOA, ERIKA; MANARIN, ROMINA; CRIBB, PAMELA

Rosario

Taller; PRIMER TALLER DE IDEAS IBR 2015; 2015

IBR-CONICET

TITULO: DECIPHERING THE PUTATIVE ROLE OF HIGH MOBILITY GROUP B PROTEIN FROM Trypanosoma cruzi IN INFLAMMATION.AUTORES: Perdomo, Virginia; Tavernelli, Luis; Ochoa, Erika; Manarin, Romina; Cribb, Pamela. METODOLOGÍA EMPLEADA: expresión de proteínas recombinantes en E. coli, extracción de proteínas fusionadas a GST mediante columnas de glutatión-agarosa, trabajo con animales de laboratorio, cultivos celulares, cuantificación de LPS, real time, determinación de nitritos. PROBLEMÁTICA: nuestra proteína recombinante de interés es expresada en E. coli, y purificada a partir de homogenados bacterianos. Además, utilizamos LPS como control positivo de activación de la respuesta inmune en nuestros modelos experimentales, por lo que es crucial que nuestros extractos proteicos, bufferes, material descartable de trabajo, etc. se encuentren libre de LPS. Nos interesa entonces conocer metodologías que disminuyan la contaminación de los extractos proteicos (principalmente) y de los reactivos y materiales de trabajo con LPS.