Estudio de la expresión de una oxidasa alternativa de tipo 1 de Citrus sinensis frente a estrés biótico

DAURELIO, L.D.; PETROCELLI, S.; OTTADO, J.; ORELLANO, E.G

Chascomús

Congreso; XXVI Reunión de la Asociación Argentina de Fisiología Vegetal; 2006

Asociación Argentina de Fisiología Vegetal

La enzima mitocondrial oxidasa alternativa (AOx) es la encargada de la vía alternativa de transporte de electrones desde el ubiquinol al O2. En plantas se compone de una familia multigénica de codificación nuclear clasificadas en dos grupos: AOx1 y AOx2/3, donde las de tipo 1 actuarían bajo condiciones de estrés biótico y abiótico. En trabajos previos fue clonado y caracterizado el gen de una AOx perteneciente a las de tipo 1 de Citrus sinensis var. Petrópolis (naranja). El objetivo de este trabajo es analizar la expresión de dicha AOx frente a situaciones de estrés biótico. Dicho análisis fue realizado por RT-PCR y además se cuantificaron los transcriptos mediante RT-PCR competitivas. Se ensayaron situaciones de estrés ante bacterias compatibles (Xanthomonas axonopodis pv. citri, Xac) e incompatibles no hospedadoras con Respuesta Hipersensible (HR) (Pseudomonas syringae pv. tomato, Pst y Xanthomonas campestris pv. vesicatoria, Xcv); ante elicitores (simulan estrés por hongos y artrópodos); y ante Ácido Salicílico (AS) 1 y 5 mM (el cual participa en la respuesta de defensa). Se analizaron distintos tiempos post-tratamiento (pt) y los respectivos controles. Las RT-PCR indican una fuerte inducción frente a Pst, Xcv y elicitores; moderada con AS (similar a ambas cc.) y leve ante Xac. Con las RT-PCR competitivas se observó una máxima inducción para elicitores a las 24 hs pt (4x107 transcriptos por ug ARN total, t/ug) decayendo a las 48 pt. El máximo de inducción para Pst y Xcv se observó entre las 8 y 24 hs pt (2x107 t/ug) decayendo lentamente hasta el nivel basal 72 hs pt. Frente a AS la máxima inducción se observó a las 8 hs pt (1x107t/ug) decayendo al nivel basal antes de las 24 hs pt. En el caso de Xac un leve aumento se observó a las 48 hs pt (3x106 t/ug) que se mantuvo hasta las 96 hs pt. Se puede concluir que esta AOx tipo 1 de naranja tendría participación en la HR mediada por bacterias (siendo este el primer caso donde se reporta) y en la interacción con hongos y artrópodos. Los mecanismos serían diferentes en ambos casos y no dependería únicamente de AS. Por otro lado no participaría en forma notoria en la interacción compatible.