Análisis del perfil de expresión y de actividad de las isoformas de catalasa en plantas de tomate

SOSSI ML; RÉ M; BOGGIO SB

Rosario

Congreso; XII Congreso y XXX Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2011

Sociedad de Biología de Rosario

ANÁLISIS DEL PERFIL DE EXPRESIÓN Y DE ACTIVIDAD DE LAS ISOFORMAS DE CATALASA EN PLANTAS DE TOMATESossi, María L.; Ré, Martín D.; Boggio, Silvana B.Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario IBR (CONICET), Facultad de Cs. Bioquímicas y Farmacéuticas, UNR, Suipacha 531, S2002LRK, Rosario.marialaurasossi@hotmail.comLas plantas superiores son organismos inmóviles que han adquirido una serie de mecanismos de supervivencia muy elaborados para responder y adaptarse al medio ambiente cambiante en el que viven. Entre los mecanismos mencionados se encuentran las catalasas, enzimas capaces de descomponer el H2O2 producida en situaciones fisiológicas y de estrés. Las catalasas de plantas conforman una pequeña familia y se ha reportado que éstas se expresan de manera diferencial de acuerdo al tejido, al estadío de desarrollo, a las condiciones ambientales y a la exposición a diferentes tipo de estreses. En el caso de Solanum lycopersicum se han descripto tres genes que codifican para catalasas: cat1, cat2 y er60. cat1 se expresa principalmente en tallos y, a niveles más bajos, en frutos y hojas y estaría relacionado con la resistencia al daño por frío. er60 se expresa en frutos y su síntesis se induce por la aplicación exógena de etileno y durante la maduración. El objetivo de este trabajo es realizar un análisis integral de la actividad de catalasa en distintos órganos de Solanum lycopersicum (cv  Micro-tom), y estudiar cuál es el perfil de expresión a nivel de ARN y de proteínas de los distintos miembros de la familia.Se realizó un análisis in sílico de las bases de datos disponibles y se identificó la secuencia de un gen que codifica para una catalasa putativa al que se llamó cat3.Se analizaron los niveles de transcriptos de cada uno de los componentes de la familia mediante la técnica de PCR en tiempo real. Se observó que la isoforma preponderante en hoja es cat2 mientras que en fruto verde es cat1 observándose un aumento de los niveles de er60  y cat3 durante la maduración.Se determinó que la actividad de catalasa depende no sólo del órgano analizado sino también de la parte del órgano estudiada. Además, se observó que en frutos la actividad catalasa  disminuye durante la maduración. Se prepararon anticuerpos contra una región altamente conservada de las catalasas y se realizaron ensayos de inmuno detección. Los resultados obtenidos demuestran que existe un patrón de expresión de catalasas en plantas de tomate Micro-tom diferente dependiendo del órgano y del estadío de desarrollo.