Estudio del mecanismo para la actividad termosensora de una quimera de DesK de Bacillus subtilis, en bicapas de DMPC

SERGIO GARAY; FERNANDO SILVEIRA; CYBULSKI LARISA; DE MENDOZA DIEGO; DANIEL RODRIGUES

BUENOS AIRES

Encuentro; XL REUNIÓN ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE BIOFÍSICA; 2011

Sociedad Argentina de Biofísica

Antecedentes Experimentales • La quinasa de histidina DesK de Bacillus subtilis es un ejemplo paradigmático de un termosensor ligado a membrana diseñado para promover la fluidez de la misma cuando la temperatura desciende por debajo de 30°C. • Una quimera mínima (QM) de esta proteína constituída por un único segmento de transmembrana de 31 residuos se ha mostrado que preserva la actividad termosensora en biomembranas y liposomas biomiméticos. • La quimera posee actividad quinasa en liposomas de DMPC a 25°C y se inactiva esta función a 37°C. Motivación • Entender el mecanismo por el cual el segmento de transmembrana de la QM sensa la temperatura de la bicapa lipídica y colabora en la transdución de la señal. Metodología • Simulaciones de Dinamica Molecular (DM) de bicapas de DMPC (Dipalmitoil Fosfatidil Colina) completamente hidratadas, a 25°C y 37°C con el sector de transmembrana de la quimera (31aa) inserto en la misma. • Campo de Fuerza empleado para la bicapa lipídica fue el desarrollado por Berger et. al, con las cargas atómicas ajustadas por nuestro grupo en trabajos previos. La QM fue descripta por el campo de Fuerzas GROMOS (53a6). • Las simulaciones se realizaron a Tension superficial constante (g=12dyn/cm), ajustada para reproducir los experimentos de perfiles de PO de Deuterio de bicapas de DMPC puras. • Se realizaron las simulaciones del sistema a ambas temperaturas, durante un tiempo de 350ns.