Aplicaciones de BioMSId: identificación de inhibidores en mezclas

AYELEN RAMALLO, I.; CABEZUDO, IGNACIO; GARCIA P; FURLAN, RICARDO L. E.; SALAZAR, MARIO; ALONSO, VICTORIA LUCIA

San Luis

Congreso; IV Congreso Argentino de Espectrometría de Masa; 2022

Sociedad Argentina de Espectrometria de Masa

En este trabajo se demuestra a través de aplicaciones la capacidad de BioMSId1 para la identificación de inhibidores en mezclas. BioMSId combina la habilidad de la bioautografía acoplada a cromatografía en capa delgada (CCD) para detectar in situ estructuras bioactivas, con la capacidad de la espectrometría de masa para identificar moléculas. De esta forma, se establece una rápida conexión entre actividad inhibitoria e identidad del compuesto activo.El método se basa en que la composición química no vinculada con la bioactividad en un halo puede ser distinta en CCDs de la misma muestra en diferentes condiciones. La comparación entre espectros permite la detección de iones comunes, y la identificación del compuesto activo.Se estudio la inhibición sobre acetilcolinesterasa de Ilex paraguariensis Saint-Hilaire. Mediante infusión directa en un equipo Bruker micrOTOF-Q II (Bruker-Daltonics), se hallaron dos valores relacionados al halo: 195,0878 m/z [M+H]+ y 217,0700 m/z [M+Na]+. Los mismos se vincularon a la fórmula C8H10N4O2 de la cafeína.1 Luego, se aplicó BioMSId para estudiar la inhibición sobre xantina oxidasa del aceite esencial bromado de Foeniculum vulgare Mill. Mediante infusión directa en un equipo Bruker micrOTOF-Q II (Bruker-Daltonics) se identificaron dos valores para el halo de inhibición: 243,0015 m/z [M+H]+ y 264,9835 m/z [M+Na]+ verificados para la fórmula C10H11BrO2 del 2-bromo-1-(4-metoxifenil) propan-1-ona, derivado bromado del anetol.2 Finalmente, se empleó BioMSId para estudiar la inhibición sobre tirosinasa de una biblioteca combinatoria de tio(semi)carbazidas. Mediante infusión directa en el equipo TSQ Quantum Access Max (QQQ) (Thermo-Scientific) se logró vincular el halo de inhibición al valor 267,12 m/z que correspondía la señal [M+H]+ del compuesto A7T1 de la biblioteca.3BioMSId puede ser exitosamente aplicado para analizar cualquier tipo de extracto activo, frente a diferentes blancos biológicos, y con datos de espectrometría de alta y baja resolución, facilitando la identificación de compuestos bioactivos en mezclas, incluso cuando son constituyentes minoritarios.