Desarrollo de AC-ELISA y RT-PCR para la detección de Triatoma Virus (TrV) en Triatoma infestans (Hemiptera:Reduviidae)

MARTI, G. A; SUSEVICH, M. L; GONZALEZ E. T; GARCIA, J.J; VIGUERA A.R; GUERIN, D.M.A.; ECHEVERRÍA M. G

Huerta Grande, Córdoba

Congreso; VII Congreso Argentino de Entomología; 2008

El Triatoma virus (TrV) es el único virus entomopatógeno encontrado en triatominos. TrV replica en las células del epitelio intestinal de triatominos, causando un alto índice de mortalidad y un retraso en la muda de los insectos infectados. En este trabajo desarrollamos un AC-ELISA (antigen-capture enzyme-linked immunosorbent assay) y una RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction) para detectar la presencia de TrV. Para el desarrollo de AC-ELISA fue necesaria la producción de antisueros. Para ello fueron inoculados conejos y gallinas con TrV purificado. La reactividad de estos antisueros fue evaluada por inmunodifusión y su especificidad fue confirmada por western blot. Posteriormente, se analizaron 90 muestras de materia fecal de Triatoma infestans. Los resultados de AC-ELISA y de RT-PCR mostraron una correlación elevada con las observaciones de la microscopía electrónica de transmisión (EM) considerada como gold standard, con valores de Kappa de 0.73 para AC-ELISA y 0.93 para RT-PCR. Estas dos técnicas servirán como herramienta para detectar presencia de TrV (partículas virales o ARN) en heces de triatominos, así como en insectos de otras especies que pudieran ser susceptibles. Además, estas técnicas permitirán el estudio de la prevalencia natural y de la distribución geográfica del TrV en poblaciones de Triatominos en la Argentina y en otros países latinoamericanos.