Herramientas destinadas a la manipulación genética de Trypanosoma cruzi.

BOUVIER, LEÓN ALBERTO; MIRANDA, MARIANA; CANEPA, GASPAR; PEREIRA, CLAUDIO

Rosario, Argentina

Congreso; VIII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias (SAP); 2008

Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias (SAP)

La manipulación genética de Trypanosoma cruzi es una labor compleja comparado a T. brucei. En parte esto se debe a particularidades propias de este organismo como prolongados tiempos de duplicación, datos fragmentados de un genoma híbrido, ausencia de mecanismos de silenciamiento, poca información acerca de regiones transcripcionalmente silenciosas, entre otras. A todo esto debemos agregar la falta de herramientas moleculares adecuadas que faciliten el estudio de este organismo. Como un aporte para revertir esta situación, nuestro grupo lleva a cabo el diseño y construcción de nuevos vectores que permitirán aumentar las posibilidades de estudio de este tripanosomátido. Durante la fase de diseño se priorizó la estandarización de cada sistema, lo que facilitará no solo la utilización sino también las potenciales modificaciones posteriores. De esta manera los vectores de sobreexpresión solo difieren en las secuencias codificantes de los genes de resistencia a blasticidina, bleomicina, geneticina, puromicina e higromicina empleados en cada caso. A su vez, estos genes formarán parte de 10 marcadores de selección alojados en un plásmido mínimo, con los que se espera poder llevar a cabo el reemplazo de secuencias genómicas. Finalmente estamos construyendo prototipos de vectores que permitan la expresión inducible de genes y que no requieran el empleo de cepas previamente transgénicas.