Estudio de los transportadores de poliaminas de Trypanosoma cruzi y su relación con la pentamidina.

CHANTAL REIGADA; MELISA MARTINEZ SAYÉ; FABIO DI GIROLAMO; CLAUDIO A. PEREIRA; MARIANA R. MIRANDA

CABA

Jornada; XIII Jornadas Científicas del Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; 2014

Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari

Los transportadores tienen particular importancia ya que en muchos casos constituyen el primer paso de muchas rutas metabólicas y de ellos depende la regulación de las mismas. El transporte de poliaminas constituye la única vía de obtención de estas moléculas esenciales para la proliferación de Trypanosoma cruzi, debido a que el parásito es incapaz de sintetizarlas de novo. Dada la esencialidad de estas moléculas y las diferencias existentes con el hospedador mamífero, el transporte y el metabolismo de poliaminas constituyen blancos terapéuticos promisorios. En trabajos anteriores de nuestro laboratorio se demostró que la pentamidina, una droga antiparasitaria utilizada contra la Leishmaniasis y la Tripanosomiasis Africana, también tiene efecto sobre T. cruzi. En el presente trabajo se realizó un estudio bioinformático del genoma del parásito que permitió identificar seis posibles transportadores de poliaminas, denominados TcPT-1 a TcPT-6. Entre los diferentes miembros identificados se encuentra el transportador de putrescina TcPT-1 (TcPAT12), que está involucrado también en el transporte de pentamidina. Bajo la hipótesis que la pentamidina ingresa a través de estos transportadores se comenzó a estudiar otro miembro de este grupo, el TcPT-3. Mediante la construcción de un modelo de Saccharomyces cerevisiae que expresan heterólogamente dicho transportador, se observó que dichas levaduras transportan significativamente más espermidina que los controles. También se determinó la localización subcelular del TcPT-3 en el bolsillo flagelar y en el complejo de la vacuola contráctil del parásito. Por otro lado, se observó que el transporte de putrescina en parásitos wild type puede ser inhibida no sólo por pentamidina sino también por su análogo DAPI, validando que poseen vías en común de ingreso a la célula. Asimismo, los parásitos transgénicos que expresan niveles elevados del transportador TcPT-1 transportan mayor cantidad de DAPI que los controles. Estos resultados sugieren que los transportadores de poliaminas podrían ser una puerta de entrada para la pentamidina y destacan la importancia del transporte y metabolismo de dichos metabolitos como blancos terapéuticos de aplicación en la Enfermedad de Chagas.