Acción del Acido Valproico sobre la expresión de TRH diencefalica en la rata SHR: regulación epigenética?

MARIA S LANDA; PERES DIAZ LUDMILA; MARIANO L. SCHUMAN; SILVIA I. GARCÍA; CARLOS J. PIROLA

San miguel de Tucuman

Congreso; XXII CONGRESO ARGENTINO DE HIPERTENSIÓN ARTERIAL; 2015

Sociedad Argentina de Hipertensión Arterial

La TRH se distribuye ampliamente en todo el sistema nervioso central. Su presencia en ciertos núcleos encefálicos que intervienen en la regulación cardiovascular, sugiriere su participación en la modulación de la función de este sistema.En la rata normal la sobreexpresión central de TRH periventricular conduce una elevación de la presión arterial sistólica (PAS) que es reversible por un tratamiento antisense específico. Este  tratamiento antisense, aplicado a las SHR, que poseen una elevación de la actividad de la TRH diencefálica (TRHd) basal, normaliza la PAS en forma dosis dependiente. Si bien son conocidos muchos de los mecanismos clásicos de regulación de la expresión de TRH, aún no se ha explorado la participación de mecanismos epigenéticos, como la acetilación de histonas o metilación del DNA, permitiendo que la cadena de DNA se encuentre más abierta o cerrada generando mayor o menor disponibilidad a la unión de factores de transcripción. Además de su conocida acción como antiepiléptico, el ácido valproico (VPA) actúa como inhibidor de las enzimas acetilasa de histonas (HDAC) con implicancias en la regulación de la expresión de genes. Teniendo en cuenta que la SHR presenta una hiperactivación del sistema TRHd, decidimos evaluar si el tratamiento con VPA era capaz de alterar la expresión de TRH en este modelo. Se utilizaron machos SHR y WKY  adultos a los que se les administró valproato de magnesio en el alimento  (700mg/kg) durante 10 semanas o dieta estándar (n=6 por grupo). Se registró el peso corporal y la PA (método plestimográfico CODA System) semanalmente hasta el sacrificio. Se extrajo RNA de diencéfalo y se realizó una retrotranscripción para evaluar la expresión de genes mediante PCR en tiempo real. Se utilizó HPRT como control de carga. Los resultados se expresan como media ± ES, ANOVA, (Fisher). Durante el desarrollo del protocolo no se observaron cambios en el consumo de alimento y peso corporal, y los animales conservaron un estado saludable. El dosaje de VPA en suero confirmó que las ratas tratadas presentaron niveles detectables de VPA  respecto a las controles. El  VPA disminuyó los niveles de PAS en las ratas SHR-VPA vs las SHR-C (220.2±3.3 vs 208.4±3.5 mmHg, n=6, p<0.05) sin generar cambios en los niveles de PAS en las ratas WKY. De acuerdo a nuestra hipótesis el tratamiento con VPA generó una disminución en la expresión de TRHd en las ratas SHR-VPA respecto a las ratas SHR-C (0.061±0.007 vs 0.023±0.008, TRH/HPRT-ua, n=6, p<0.05), sin cambios en la expresión de TRH en las WKY. De esta manera podemos sugerir que el VPA a través de su capacidad para inhibir HDAC como mecanismo de regulación génica, disminuye la expresión de TRHd la que induciría una disminución en los valores de PAS.