Estudio de las características proliferativas de Phytomonas Jma y transfección con el gen de GFP.

CARRILLO, CAROLINA; ZADIKIAN, C; CANEPA, GASPAR; PEREIRA, CA

Chascomus

Congreso; XXII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología (SAP); 2007

BBM      Estudio de las características proliferativas de Phytomonas Jma y transfección con el gen de GFP. CARRILLO C1,3,5, ZADIKIAN C1, CANEPA GE2,5, PEREIRA CA2,5. 1Lab. de Regulación en Bacterias y Parásitos, FIL / 2Instituto de Investigaciones Médicas (IDIM), FMED, UBA-CONICET/ 3Dto. de Química Biológica, FCEyN, UBA / 4FBMC, FCEyN, UBA / 5CONICET. ccarrillo@leloir.org.ar.   El género Phytomonas agrupa tripanosomátidos que infectan diversas plantas de importancia económica. El estadio promastigote es cultivado axénicamente en medios GRACE y LIT. En este trabajo estudiamos la proliferación de Phytomonas Jma en BHT y SDM79, que fue similar a la descripta en GRACE y LIT. Además, Phytomonas resultó ser insensible a inhibidores de biosíntesis de poliaminas (10mM DFMO y CHA) y sensible al antibiótico G418. Habiendo determinado condiciones de proliferación y selección se realizo una transfección con el gen de la GFP, clonado en pRibotex o pTrex. Ambos presentaron similar eficiencia de transfección (aprox 2-3 %) y similar disminución en viabilidad y capacidad proliferativa post-electroporación. En presencia de G418 el cultivo electroporado con pTrex-GFP recuperó su proliferación luego de 15 - 20 días, presentando expresión de GFP,  mientras que el electroporado con pRibotex-GFP no recuperó la proliferación ni expresó GFP establemente. El estudio de Phytomonas sp. podría permitir el uso de este parásito como herramienta para la expresión y caracterización de genes heterólogos.